FITC-Avidin，绿色荧光素标记亲和素

FITC-Avidin：绿色荧光素标记亲和素

FITC-Avidin是将绿色荧光素（FITC，异硫氰酸荧光素）与亲和素通过化学偶联制备而成的荧光共轭试剂，是免疫荧光检测领域中*经典、*常用的试剂之一。该产品融合了亲和素-生物素系统的高特异性高亲和结合优势与FITC染料的明亮绿色荧光特性，可实现对生物靶标的高效标记与可视化检测，具有特异性强、信号稳定、易于观察等显著优势，广泛应用于生物医学研究与临床诊断。

亲和素是一种源自蛋清的四聚体糖蛋白，分子量约68 kDa，每个亚基均含有一个生物素结合位点，结合常数高达10¹⁵ M⁻¹，能与生物素化的靶标分子发生特异性、高亲和力结合，为荧光信号的精准定位提供保障。FITC是一种常用的绿色荧光染料，*大激发波长约495 nm，*大发射波长约519 nm，发出明亮的绿色荧光，荧光量子产率高，光稳定性较好，且激发光易获得（常用蓝光激发），是荧光显微镜、流式细胞仪等常用检测设备的理想适配染料。FITC-Avidin的制备采用异硫氰酸酯反应法：FITC分子上的异硫氰酸酯基团（-NCS）可与亲和素分子表面赖氨酸残基上的氨基（-NH2）发生特异性反应，形成稳定的硫脲键，实现FITC与亲和素的共价偶联。制备过程中需严格控制反应条件，如FITC与亲和素的摩尔比、反应pH值（通常为8.0-9.0）、反应温度与时间等，以确保标记率的稳定性与蛋白活性的完整性。反应完成后，通过凝胶过滤层析或透析等方法去除未反应的游离FITC染料和杂质，得到高纯度的FITC-Avidin。优质的FITC-Avidin标记率通常为3-5个FITC分子/亲和素四聚体，亲和素生物素结合活性保持率不低于85%，荧光信号强度稳定。

应用领域上，FITC-Avidin广泛应用于免疫荧光成像（IF）、免疫组织化学（IHC）、免疫细胞化学（ICC）、流式细胞术（FCM）、荧光原位杂交（FISH）等实验技术。在免疫荧光成像中，可作为荧光二抗偶联物，与生物素化的一抗结合，实现对细胞或组织中靶蛋白的定位与表达水平分析，其明亮的绿色荧光可通过荧光显微镜直接观察，是细胞生物学研究中蛋白定位分析的常用工具；在流式细胞术分析中，可与生物素化的细胞表面标志物抗体结合，对细胞群体进行快速分类、计数与定量分析，广泛应用于免疫学研究、临床血液学诊断（如免疫细胞亚群分析）等领域；在IHC和ICC实验中，可用于标记生物素化探针，对组织或细胞中的靶蛋白进行显色定位，助力疾病病理机制的研究与临床病理诊断；在FISH实验中，可用于标记生物素化的核酸探针，实现染色体或基因片段的精准定位，为遗传病诊断与基因表达调控研究提供重要依据。此外，还可应用于蛋白质印迹（Western Blot）、酶联免疫吸附试验（ELISA）等免疫检测技术的信号检测。

使用FITC-Avidin时需注意以下要点：储存条件为-20℃避光密封保存，建议加入0.02%的叠氮钠作为防腐剂，避免微生物污染；使用前需在冰上缓慢解冻，并用合适的缓冲液（如PBS，pH 7.2-7.4）进行适当稀释，稀释后应在短期内使用，避免反复冻融；实验过程中需严格避光操作，尤其是在孵育和成像阶段，FITC对光较为敏感，易发生荧光淬灭；孵育温度建议控制在室温或37℃，孵育时间为30-60分钟，确保特异性结合充分；由于亲和素存在一定的非特异性结合倾向，可在孵育液中加入1-5%的牛血清白蛋白（BSA）或脱脂奶粉作为封闭剂，降低非特异性结合；同时，需避免使用含有强还原剂（如DTT、β-巯基乙醇）的缓冲体系，以免破坏FITC的荧光结构与偶联键；在流式细胞术分析中，需注意染料浓度的控制，避免浓度过高导致荧光信号溢出。

用途：科研

包装：瓶装

产地：西安瑞禧生物科技有限公司  

关于我们：

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