CY5.5-Lysozyme 花菁染料Cy5.5标记溶菌酶
CY5.5-Lysozyme是通过共价偶联技术将花菁染料Cy5.5标记到溶菌酶分子上形成的荧光标记蛋白。其中,Cy5.5是一种性能优良的近红外花菁染料,激发波长约675 nm,发射波长约694 nm,相较于Cy5,其荧光波长更长,在生物组织中的穿透深度更深,且受生物体内自发荧光的干扰更小;溶菌酶作为一种具有天然*菌活性的碱性蛋白,分子结构稳定、生物相容性好,其活性中心可特异性识别并水解细菌细胞壁的肽聚糖,在天然免疫防御中具有重要作用。CY5.5-Lysozyme完美结合了Cy5.5的高效近红外荧光示踪能力与溶菌酶的生物活性和生物相容性,是开展深层组织成像、活体示踪及*菌机制研究的理想工具。
该标记蛋白的制备需严格控制反应条件,以实现染料与溶菌酶的高效偶联,同时*大限度保留溶菌酶的生物活性。常用的制备方法为活性酯法,具体步骤如下:首先选取适宜的缓冲体系(如pH 8.0-8.5的Tris-HCl缓冲液)溶解溶菌酶,确保蛋白处于稳定的天然构象;将Cy5.5-NHS酯(Cy5.5的活性酯衍生物)溶解于无水DMSO中,缓慢滴加到溶菌酶溶液中,控制Cy5.5-NHS酯与溶菌酶的摩尔比在3:1-15:1之间,摩尔比过高易导致蛋白表面过多氨基被修饰,破坏活性中心或引起蛋白聚合,摩尔比过低则标记率不足,影响荧光示踪效果;在室温、避光条件下搅拌反应1-3小时,期间维持反应体系的pH稳定;反应完成后,采用凝胶过滤层析(如Sephadex G-25)或透析法纯化产物,去除游离的Cy5.5染料和有机溶剂;纯化后需对产物进行全面质量检测:通过SDS-PAGE电泳验证蛋白纯度,利用荧光分光光度计测定荧光强度、激发/发射波长及Cy5.5标记率,采用浊度法检测溶菌酶对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等标准菌株的抑菌活性,确保标记后溶菌酶的活性保留率满足实验要求,同时荧光信号稳定、可重复。
CY5.5-Lysozyme的核心优势在于其长波长近红外荧光特性,使其在活体成像、深层组织研究及临床前诊断相关研究中具有不可替代的应用价值。在活体生物医学研究中,将CY5.5-Lysozyme注入实验动物体内后,可通过近红外活体成像系统实时监测其在体内的分布、靶向富集情况及代谢清除速率,为溶菌酶类药物的药代动力学、药效学研究提供直观的影像学数据,尤其适合研究溶菌酶在肝脏、脾脏等深层组织中的作用过程;在细菌感染机制研究中,可利用Cy5.5的近红外荧光信号,追踪溶菌酶在感染部位的聚集过程,观察其与细菌的相互作用,深入探究溶菌酶在感染防御中的作用机制;在临床前诊断研究中,可作为靶向探针用于细菌感染灶的定位成像,借助溶菌酶对细菌的特异性结合能力,实现感染部位的精准识别,为感染性疾病的早期诊断提供新方法;此外,还可用于细胞内溶菌酶的转运与定位研究、溶菌酶-受体相互作用分析等场景。相较于Cy5、FITC等短波长荧光标记的溶菌酶,CY5.5-Lysozyme的荧光穿透性更强、背景干扰更低,成像清晰度更高,尤其适合活体和深层组织样品的研究,是溶菌酶相关基础研究与临床转化研究的重要工具蛋白。
用途:科研
包装:瓶装
产地:西安瑞禧生物科技有限公司

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关键字: 花菁染料Cy5.5标记溶菌酶;Lysozyme-CY5.5;CY5.5-Lysozyme;
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