CY7-Lysozyme，近红外染料Cy7标记溶菌酶

CY7-Lysozyme，近红外染料Cy7标记溶菌酶

CY7-Lysozyme是近红外染料Cy7与溶菌酶通过共价键连接形成的荧光标记蛋白。Cy7作为一种高性能近红外荧光染料，激发波长约750 nm，发射波长约773 nm，处于生物组织“光学窗口”（700-1000 nm）内，该波段的光在生物组织中散射和吸收系数*低，穿透深度可达数厘米，且几乎不受生物体内血红蛋白、水等成分的吸收干扰，自发荧光背景*弱；溶菌酶是一种分子量小（约14.3 kDa）、结构稳定、具有天然*菌活性的碱性蛋白，广泛存在于蛋清、唾液、泪液等体液中，可特异性水解细菌细胞壁肽聚糖，在机体天然免疫中发挥关键作用。二者结合形成的CY7-Lysozyme，既保留了溶菌酶的生物活性和特异性结合能力，又具备Cy7的高效近红外荧光示踪特性，是活体成像、深层组织研究及靶向检测的核心工具蛋白。

CY7-Lysozyme的制备采用温和且特异性高的化学偶联策略，核心是在不破坏溶菌酶活性中心的前提下，实现Cy7与溶菌酶的高效、稳定偶联。常用的修饰剂为Cy7-NHS酯，其活性酯基团可特异性识别溶菌酶分子赖氨酸残基上的ε-氨基，发生酰胺化反应形成稳定的共价键。具体制备流程如下：首先将溶菌酶溶解于pH 8.2-8.8的碳酸盐缓冲液中，该缓冲体系可促进活性酯与氨基的反应，同时维持溶菌酶的天然构象；将Cy7-NHS酯溶解于少量无水DMSO中（DMSO体积不超过反应体系总体积的10%，避免影响蛋白稳定性），缓慢滴加到溶菌酶溶液中，控制Cy7-NHS酯与溶菌酶的摩尔比在2:1-10:1之间，通过调节摩尔比控制标记率，通常理想标记率为每个溶菌酶分子结合2-5个Cy5分子；在室温、避光条件下温和搅拌反应2-4小时，期间定期监测反应体系的pH值，确保反应顺利进行；反应完成后，采用凝胶过滤层析（如Superdex 75层析柱）进行纯化，该方法可有效分离标记蛋白与游离Cy7染料，获得高纯度产物；纯化后需进行全面的质量表征：通过SDS-PAGE和HPLC验证蛋白纯度（纯度需≥95%），利用荧光分光光度计测定荧光光谱、荧光量子产率及Cy7标记率，采用比浊法或平板抑菌法检测溶菌酶的*菌活性，确保标记后溶菌酶的活性保留率≥85%，荧光信号稳定且可重复。

CY7-Lysozyme的长波长近红外荧光特性使其在活体生物医学研究、临床前诊断、*菌机制研究等领域具有独特且重要的应用价值。在活体成像研究中，将CY7-Lysozyme通过静脉注射或局部给药注入实验动物体内后，可利用近红外活体成像系统实时、无创地监测其在体内的分布、靶向富集部位、代谢过程及清除速率，为溶菌酶类药物的药代动力学研究、靶向递送系统优化提供直观的影像学数据，尤其适合研究溶菌酶在肿瘤组织、感染部位等深层组织中的靶向作用过程；在细菌感染的临床前诊断研究中，借助溶菌酶对细菌的特异性结合能力，CY7-Lysozyme可作为靶向荧光探针，实现对体内细菌感染灶的精准定位和成像，为感染性疾病的早期诊断、病情评估及治疗效果监测提供新手段；在*菌机制研究中，可利用Cy7的近红外荧光信号，在活细胞或活体水平实时追踪溶菌酶与细菌的结合、内化过程，观察溶菌酶对细菌细胞壁的水解作用及细菌的裂解过程，深入揭示溶菌酶的*菌分子机制；此外，还可用于细胞内溶菌酶的转运路径研究、溶菌酶-受体相互作用分析、*菌药物筛选等场景。相较于Cy5、Cy5.5等短波长近红外染料标记的溶菌酶，CY7-Lysozyme的穿透深度更深、背景荧光更低、成像信噪比更高，更适合大动物模型和深层组织的研究，是溶菌酶相关基础研究向临床转化的重要桥梁工具。

用途：科研

包装：瓶装

产地：西安瑞禧生物科技有限公司  

关于我们：

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