5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脱氧尿苷-3'-O-[O-(2-氰基乙基)-N,N'-二异丙基亚磷酰胺]

核心作用与机制

1. 固相 DNA / 寡核苷酸合成核心单体

• 5'-DMT 保护 5'- 羟基防副反应，3'- 亚磷酰胺（O-2 - 氰基乙基 - N,N'- 二异丙基）为活性偶联基团，在固相合成循环中与延伸链 5'-OH 缩合，实现 dU 的程序化掺入。

• 合成流程：脱 DMT→偶联→加帽→氧化→循环，最终切割脱保护得含 dU 的寡核苷酸。

2. 分子生物学与医药研发应用

   应用场景	具体作用
   DNA 测序与探针制备	dU 掺入链中，后续可通过尿嘧啶 - DNA 糖苷酶（UDG）实现位点特异性切割，用于测序引物、分子信标、qPCR 探针设计
   基因合成与编辑	构建含 dU 的基因片段，适配重组、克隆与 CRISPR 相关实验，提升编辑灵活性
   修饰寡核苷酸研发	用于制备硫代磷酸酯、2'-O - 甲基等修饰寡核苷酸，适配反义核酸、siRNA 等药物研发
   生物偶联与标记	dU 位点可引入炔基、叠氮等官能团，实现荧光、生物素标记，用于成像与诊断试剂开发

3. 质量与工艺价值

• 高纯度单体保障偶联效率（通常＞98%），降低合成副产物，适配大规模寡核苷酸 GMP 生产。

• 3'- 氰乙基保护基易在氨解中脱除，5'-DMT 可实时监测脱保护效率，便于工艺质控。

关键结构功能

• 5'-O-DMT：可逆保护 5'-OH，TCA 可脱除，DMT 阳离子显色用于偶联效率监测。

• 2'- 脱氧尿苷（dU）：替代胸腺嘧啶（dT），引入可酶切 / 修饰位点，适配 UDG 介导的链切割与生物偶联。

• 3'- 亚磷酰胺：提供缩合活性，氰乙基为磷酸酯保护基，氨解可去除，二异丙基胺提升反应选择性。

下游与延伸应用

• 科研：用于定点突变、DNA 损伤修复研究、适配体筛选；医药：反义寡核苷酸、mRNA 疫苗关键原料；诊断：分子探针、测序试剂盒核心组分。