蜜蜂微孢子虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

蜜蜂微孢子虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

专用于东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）及西方蜜蜂微孢子虫（Nosema apis）的定性与定量检测，仅限科研使用。

产品特点

高灵敏度与特异性：引物针对微孢子虫高度保守区域设计，避免与其他微生物DNA交叉反应。

双重功能：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，避免假阴性干扰。

即用型设计：预混优化PCR体系，用户仅需提供DNA模板。

稳定安全：标准品为非活体材料，降低生物污染风险。

试剂盒组成

PCR预混液（含SYBR Green I染料、dNTPs、Taq酶等）

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL DNA片段）

引物混合液（针对蜜蜂微孢子虫特异性序列）

荧光PCR专用模板稀释液

超纯水（无核酸酶）

规格：50次/盒（20μL反应体系）。

操作步骤

1. 标准曲线制备（以6个10倍稀释梯度为例）：

标记离心管（2~7号），每管加入45 μL稀释液。

取5 μL阳性对照（10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10⁷拷贝/μL标准品，依次稀释至10²拷贝/μL。

2. PCR反应体系（20μL/反应）：

模板DNA：2 μL

PCR预混液：10 μL

引物混合液：2 μL

超纯水：补至20 μL

3. 扩增程序：

预变性：95℃ 3分钟

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）

熔解曲线分析：60~95℃（验证扩增特异性）。

注意事项

分区操作：标准品稀释需在独立区域进行，避免污染。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

应用限制：不可用于临床诊断或活体检测。

质量控制

阳性对照：Ct值应≤30，熔解曲线为单一峰。

阴性对照：无扩增信号。

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