马隐秘杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Arcanobacterium equi Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3394
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术,针对马隐秘杆菌基因保守区域设计特异性引物。在扩增过程中,SYBR Green与双链DNA结合释放荧光信号,通过实时监测荧光强度实现核酸的定性与定量分析。
试剂盒组成
| 组分名称 | 规格及包装 |
| 马隐秘杆菌扩增液 | 50μL ×1管 |
| 马隐秘杆菌反应液 | 950μL ×1管 |
| 阳性质控品(DNA) | 50μL ×1管 |
| 超纯水(无核酸酶) | 1 mL ×1管(可选) |
操作步骤
样本处理:提取待测样本DNA,建议使用柱式核酸提取试剂盒。
反应体系配制(以40μL为例):
反应液 38μL + 扩增液 2μL + DNA模板 5μL(建议浓度≥10 ng/μL)。
阳性对照:以阳性质控品替代模板。
PCR程序设置:
预变性:95℃ 5分钟;
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光);
熔解曲线分析:60℃~95℃,每0.5℃升温5秒。
结果判读
阳性:Ct值≤35,且熔解曲线呈现单一峰值;
阴性:无Ct值或Ct值>40,熔解曲线无特异峰;
可疑:35<Ct值≤40,建议重复检测。
注意事项
本产品仅限科研使用,不适用于临床诊断。
实验需在无菌环境下操作,避免交叉污染。
不同批号试剂组分不可混用。
熔解曲线分析需确认无非特异性扩增。
性能参数
灵敏度:可检测低至10拷贝/μL的马隐秘杆菌DNA;
特异性:与常见近缘菌种无交叉反应;
线性范围:10^1~10^6拷贝/μL(R²≥0.99)。
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