马苏大麻哈鱼病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

马苏大麻哈鱼病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

高特异性：基于马苏大麻哈鱼病毒保守序列设计的引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。

便捷性：预混含染料的PCR MasterMix，即开即用，仅需提供模板核酸。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

兼容性：适配常见荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad等）。

试剂盒组分

| 成分 | 规格/数量 |

| 2×PCR MagicMix（含染料） | 1 mL × 2 |

| OMV特异性引物混合液 | 200 μL |

| 阳性对照（OMV RNA） | 50 μL |

| RNase-Free水 | 1 mL |

| 使用说明书 | 1份 |

需自备器材

仪器：荧光定量PCR仪、离心机、微量移液器（2-1000 μL）、组织匀浆器。

耗材：PCR反应管（0.2 mL）、无核酸酶吸头、离心管（1.5 mL）。

操作步骤

样本处理：提取待测样本RNA，建议使用配套核酸提取试剂。

反应体系配制（20 μL/反应）：

2×PCR MagicMix：10 μL

引物混合液：2 μL

模板RNA：2 μL

RNase-Free水：补至20 μL

PCR程序：

逆转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 3分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

数据分析：根据标准曲线计算病毒拷贝数，阈值循环数（Ct值）≤35判为阳性。

注意事项

避免试剂反复冻融，建议分装保存。

操作时需穿戴防护装备，防止RNA降解。

阳性对照需在独立区域操作，避免污染。

实验废弃物需按生物危害物处理。

质量控制

阳性对照：应检出典型S型扩增曲线，Ct值≤30。

阴性对照：无扩增信号（Ct值≥40或无信号）。

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