小鼠趋化因子CCL11(Eotaxin (CCL11))elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性
双抗体夹心ELISA技术
捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠CCL11单抗（如大鼠IgG2b），靶向CCL11的N端表位（检测范围8–500 pg/mL）。
信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏TMB显色（灵敏度2 pg/mL）。
抗干扰设计：含CC类趋化因子阻断剂（如CCL24/CCL26阻断肽），交叉反应率＜0.5%。
动态范围优化
覆盖生理水平（健康小鼠血清＜10 pg/mL）至过敏/炎症状态（如哮喘模型BALF中＞200 pg/mL）。
二、核心组分与样本要求
组分 技术参数
预包被96孔板 抗CCL11单抗固定化（批间差＜6%），可拆分使用
标准品 重组小鼠CCL11（0、8、32、125、250、500 pg/mL，含0.1% HSA冻干保护剂）
适用样本 血清、血浆（EDTA抗凝）、支气管肺泡灌洗液（BALF）、组织匀浆（含蛋白酶抑制剂）
特殊添加剂 含0.05% Proclin 300防腐剂，2–8℃保存有效期18个月
三、应用场景与科研价值
过敏性疾病研究
哮喘模型：OVA致敏小鼠BALF中CCL11＞150 pg/mL提示嗜酸性粒细胞浸润。
特应性皮炎：皮肤组织中CCL11与嗜酸性粒细胞活化正相关。
寄生虫感染
旋毛虫感染小鼠肠道CCL11水平升高（＞100 pg/mL），反映Th2型免疫应答。
纤维化疾病
肺纤维化模型中CCL11通过CCR3受体促进成纤维细胞增殖。
四、操作规范与质控要点
样本处理
BALF样本需离心（300×g，10分钟）去除细胞碎片，-80℃保存避免反复冻融。
组织匀浆需含1% Triton X-100裂解液。
实验关键
温育条件：37℃避光45分钟，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。
质控标准
每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜10%）。
五、性能比较与注意事项
特性 优势 局限性
灵敏度 可检测天然CCL11及CCL11-CCR3复合物 无法区分CCL11不同糖基化修饰亚型
特异性 与CCL24/CCL26交叉反应＜0.5% 高脂血样本需超速离心（＞10,000×g）
通量 适配全自动平台 组织样本需优化裂解缓冲液
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