小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术
捕获抗体:微孔板预包被抗小鼠MMP-3单抗(如兔IgG),靶向MMP-3的催化结构域(检测范围0.2–50 ng/mL)。
信号放大:生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统,搭配超敏TMB显色(灵敏度0.1 ng/mL)。
抗干扰设计:含TIMP-1/TIMP-2阻断剂(交叉反应率<0.5%),避免与抑制剂复合物结合。
动态范围优化
覆盖生理水平(健康小鼠血清<1 ng/mL)至病理浓度(如关节炎模型关节液>20 ng/mL)。
二、核心组分与样本要求

组分 技术参数
预包被96孔板 抗MMP-3抗体固定化(批间差<7%),可拆分使用
标准品 重组小鼠MMP-3(0、0.5、2、10、25、50 ng/mL,含5%甘油冻存保护剂)
适用样本 血清、血浆(EDTA抗凝)、关节液、组织匀浆(需含10 mM EDTA抑制酶活性)
特殊添加剂 含1 mM APMA(激活前体MMP-3),2–8℃保存有效期24个月
三、应用场景与科研价值

关节炎研究
胶原诱导性关节炎(CIA)模型:关节液中MMP-3>15 ng/mL提示软骨降解活跃。
骨关节炎:与Aggrecan降解片段(ARGS-aggrecan)联合检测可评估疾病进展。
肿瘤转移
乳腺癌肺转移模型中MMP-3通过降解基底膜促进侵袭(>10 ng/mL提示高转移风险)。
组织重塑
心肌梗死后MMP-3水平升高(3–7天达峰),反映细胞外基质重构。
四、操作规范与质控要点

样本处理
组织样本需液氮速冻,裂解液含蛋白酶抑制剂(避免MMP-3自降解)。
避免使用肝素抗凝血浆(干扰MMP-3与金属离子结合)。
实验关键
温育条件:37℃避光1小时,洗涤液需含0.1% Tween-20(pH 7.4)。
质控标准
每板需含:标准曲线(R2≥0.99)、高/低值质控(CV<10%)。
五、性能比较与注意事项

特性 优势 局限性
灵敏度 可检测活性及酶原形式MMP-3 无法区分MMP-3不同剪切亚型
特异性 与MMP-1/MMP-13交叉反应<0.5% 高浓度样本需稀释验证(>50 ng/mL)
通量 适配自动化平台 组织样本需优化裂解效率
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