小鼠Mouse ST2/IL-33R(ST2/IL-33R)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性
双抗体夹心ELISA技术
捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠sST2单抗（如大鼠IgG2b），靶向sST2的Ig样结构域（检测范围10–2000 pg/mL）。
信号放大：HRP标记的二抗与化学发光底物联用（灵敏度3 pg/mL），特异性识别可溶性ST2（sST2），不与膜结合型ST2（ST2L）交叉反应。
抗干扰设计：含IL-33中和抗体（1 μg/mL），阻断sST2-IL-33复合物干扰（交叉反应率＜0.1%）。
动态范围优化
覆盖基础水平（健康小鼠血清＜50 pg/mL）至病理浓度（如心肌纤维化模型＞800 pg/mL）。
二、核心组分与样本要求
组分 技术参数
预包被96孔板 抗sST2（D3-D4表位）抗体固定化（批间差＜6%）
标准品 重组小鼠sST2（0、10、50、200、500、1000、2000 pg/mL，含0.1% BSA稳定剂）
适用样本 血清（首选）、血浆（EDTA抗凝）、心脏组织匀浆（需含1% Triton X-100裂解）
特殊添加剂 含5 mM DTT（维持二硫键稳定性），2–8℃保存有效期24个月
三、应用场景与科研价值
心血管疾病研究
心肌肥厚模型：sST2水平与心肌纤维化程度正相关（TAC术后＞500 pg/mL）。
心力衰竭：sST2/BNP比值＞0.15提示不良预后（敏感性85%）。
免疫调控机制
sST2通过竞争性结合IL-33抑制Th2型免疫应答（过敏性哮喘模型验证）。
纤维化疾病
肺纤维化小鼠BALF中sST2升高（＞200 pg/mL），反映IL-33/ST2L通路激活。
四、操作规范与质控要点
样本处理
心脏组织需液氮速冻，裂解液含蛋白酶抑制剂（避免sST2降解）。
避免使用肝素抗凝血浆（影响IL-33结合能力）。
实验关键
温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。
质控标准
每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（回收率90–110%）。
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五、性能比较与注意事项
特性 优势 局限性
灵敏度 可检测低至3 pg/mL的sST2 无法区分sST2不同糖基化修饰亚型
特异性 与ST2L交叉反应＜0.1% 溶血样本需超速离心（＞12,000×g）
通量 适配全自动平台 组织样本需验证裂解效率
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