重组牛早孕相关糖蛋白-2(PAG-2 protein)elisa试剂盒

1. 概述

PAG-2是胎盘滋养层特异性分泌的糖蛋白（分子量55-70 kDa），作为早期妊娠标志物，其检测可提高奶牛妊娠诊断准确率。本试剂盒采用重组PAG-2抗原，适用于奶牛配种后28天起的早期妊娠筛查和繁殖管理。

 2. 检测原理

双抗体夹心ELISA（高亲和力配对抗体）：

捕获抗体：预包被抗PAG-2单抗（克隆PB1）

检测抗体：生物素化抗PAG-2多抗（识别不同表位）

信号放大：链霉亲和素-HRP催化化学发光（检测范围：0.5-50 ng/mL）

3. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T（可拆）  2-8℃  低非特异吸附处理

rPAG-2标准品  0.5-50 ng/mL  -80℃  糖基化修饰（>95%纯度）

生物素化抗体  100 μL  -20℃  亲和纯化

血清稀释液  50 mL  4℃  含10%胎牛血清

化学发光底物  12 mL  4℃（避光）  超敏型（LOD 0.1ng/mL）

4. 样本要求

适用样本：

奶牛血清（建议配种后28-35天采样）

血浆（EDTA抗凝，避免溶血）

乳汁（需离心去脂）

前处理：

血清：3000g离心10min去沉淀

乳汁：1:5稀释后检测

临界值：

妊娠阳性：≥2.5 ng/mL（特异性98%）

可疑范围：1.0-2.5 ng/mL建议复检

5. 实验流程优化

标准曲线建立：

0.5、1、5、10、25、50 ng/mL梯度

四参数logistic拟合（R2≥0.99）

抗干扰措施：

添加10%小鼠血清阻断异嗜性抗体

高脂样本用Lipoclear处理

质控要求：

阴性对照（未孕牛血清）RLU<500

阳性对照（妊娠45天血清）CV<10%

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