一、试剂盒核心信息
检测目标:大鼠Fas(CD95/TNFRSF6),一种凋亡相关受体,通过结合FasL激活死亡信号通路,调控细胞程序性死亡。
方法学:双抗体夹心ELISA(主流方案),特异性检测可溶性Fas(sFas)及膜结合型Fas片段。
适用样本:血清、血浆(EDTA抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆(如脾脏、胸腺,需添加蛋白酶抑制剂)。
产品名称 | 大鼠Fas/TNFRSF6elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1448 |
英文名称 | RatFas/TNFRSF6 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
二、关键组分与性能特点
1. 主要组分
预包被板:抗大鼠Fas单抗包被的96孔板(部分品牌提供可拆卸条板)。
标准品:重组大鼠Fas(浓度梯度通常为10–2000 pg/mL,覆盖凋亡模型中的表达范围)。
检测系统:生物素-链霉亲和素-HRP放大系统,TMB显色(终止后黄色,450 nm检测)。
辅助试剂:样本稀释液(含Triton X-100,增强膜结合型Fas释放)。
2. 性能参数
灵敏度:最低检测限可达3 pg/mL(超敏版本可至0.5 pg/mL)。
特异性:不与大鼠TNF-R1、DR4/5交叉反应。
稳定性:未开封试剂盒4℃保存有效期至2026年(标准品需-80℃冻存)。
三、实验流程与优化建议
1. 典型步骤
① 样本预处理(组织匀浆需超声破碎,离心取上清)→
② 加样孵育(37℃ 2小时)→
③ 洗涤→
④ 加酶标二抗(1小时)→
⑤ 显色终止→
⑥ 读数(450 nm,参考630 nm校正)。
2. 关键注意事项
样本保存:sFas在-80℃可稳定6个月,避免反复冻融(建议分装)。
干扰排除:高浓度可溶性FasL(>10 ng/mL)可能竞争性抑制检测。
标准曲线拟合:推荐四参数逻辑(4PL)模型,尤其关注低浓度区间。
四、应用场景
凋亡机制研究:肝损伤、神经退行性疾病中Fas/FasL通路的激活。
自身免疫疾病:如系统性红斑狼疮(SLE)模型中Fas介导的淋巴细胞凋亡异常。
肿瘤免疫:评估肿瘤细胞通过sFas逃避免疫清除的机制。
五、时效性提示
技术更新:2025年部分品牌推出“多重检测版”,可同步检测Fas、FasL及Caspase-3活性片段。
替代方案:若需定位Fas膜表达,建议结合流式细胞术或免疫组化(IHC)。
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