大鼠Neutrophoi Elastase-2elisa试剂盒
一、试剂盒基本信息

检测目标:大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶-2(NE-2)
检测方法:双抗体夹心法ELISA(酶联免疫吸附试验)
样本兼容性:血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清等
灵敏度:通常≤1 pg/mL(不同品牌可能略有差异)
检测范围:15–1000 pg/mL(标准曲线范围可覆盖低丰度样本)
特异性:仅识别大鼠NE-2,与其它物种(如人、小鼠)或相似蛋白无交叉反应
产品名称 | 大鼠Neutrophoi Elastase-2elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1482 |
英文名称 | RatNeutrophoi Elastase-2 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
二、实验原理

捕获阶段:微孔板预包被抗大鼠NE-2抗体,加入样本后,NE-2被特异性捕获。
结合阶段:加入生物素或HRP标记的二抗,与NE-2另一表位结合。
信号放大:通过链霉亲和素-HRP或直接酶标抗体催化TMB显色。
定量分析:450 nm测OD值,浓度与吸光度成正比,标准曲线计算样本含量。
三、试剂盒核心组分

组分名称 作用说明
预包被96孔板 已固定捕获抗体,直接使用
NE-2标准品(冻干粉) 用于绘制标准曲线(需复溶稀释)
检测抗体(HRP标记) 特异性识别NE-2,催化显色
TMB显色液 底物,遇HRP产生蓝色→黄色变化
终止液(2M HSO) 终止反应,稳定颜色
洗涤缓冲液(20×) 洗涤未结合物质,需稀释使用
四、操作流程(简化版)

标准品准备:梯度稀释至0–1000 pg/mL。
加样孵育:样本/标准品加入孔中,37℃孵育1–2小时。
洗涤:洗板3–5次,去除未结合蛋白。
二抗孵育:加入HRP标记抗体,37℃孵育1小时。
显色:加TMB避光反应15分钟(蓝色)。
终止检测:加终止液变黄色,立即测OD450 nm。
五、典型应用场景

炎症性疾病研究:如急性肺损伤(ALI)、慢性阻塞性肺病(COPD),NE-2是中性粒细胞活化的关键标志物。
药物筛选:评估抗炎药物对NE-2活性的抑制效果(如α1-抗胰蛋白酶类似物)。
感染与免疫:研究细菌/病毒感染中中性粒细胞介导的免疫反应。
六、注意事项

样本处理:避免反复冻融,血浆需用EDTA/肝素抗凝,离心去除杂质。
实验优化:首次使用建议做预实验,优化抗体稀释比例或孵育时间。
干扰因素:高脂血或溶血样本可能导致假阳性,需预处理。
数据可靠性:建议复孔检测,CV值应<10%。
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