大鼠OPN-Osteopontinelisa试剂盒
概述
本试剂盒采用 双抗体夹心ELISA法，可高灵敏度、高特异性地定量检测大鼠 血清、血浆、细胞培养上清、骨组织匀浆、尿液 等样本中的 OPN 含量。
检测原理
双抗体夹心ELISA：
预包被抗体：微孔板包被抗大鼠OPN单克隆抗体。
样本结合：样本中的OPN与包被抗体结合。
检测抗体：加入生物素或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色反应：加入TMB底物，HRP催化显色（蓝色→黄色）。
终止检测：加入终止液（硫酸或磷酸），450 nm测OD值，计算浓度。
产品名称 | 大鼠OPN-Osteopontinelisa试剂盒 | 货号 | XG-R1484 |
英文名称 | RatOPN-Osteopontin ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
试剂盒组成
组分 说明
预包被96孔板 抗大鼠OPN抗体包被
标准品（0-100 ng/mL） 重组大鼠OPN（冻干或液体）
检测抗体 生物素/HRP标记抗大鼠OPN抗体
TMB显色液 HRP底物（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）
终止液 1M/2M硫酸或磷酸
洗涤缓冲液（10×或20×） PBS-Tween 20
样本稀释液 适用于血清/血浆/组织匀浆
检测范围 & 灵敏度
检测范围：0.156–100 ng/mL（不同品牌可能略有差异）。
最低检测限（灵敏度）：<0.1 ng/mL。
特异性：仅检测大鼠OPN，不与其他SIBLING蛋白（如BSP、DMP1）交叉反应。
重复性：板内CV <8%，板间CV <10%。
样本要求
样本类型 处理建议
血清/血浆 离心（3000 rpm, 10 min）去除杂质
骨组织匀浆 液氮研磨后裂解，离心（10000×g, 10 min）取上清
尿液 离心（2000 rpm, 5 min）去除沉淀
细胞培养上清 直接检测或适当稀释
储存条件：短期（24h）可4℃保存，长期需-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。
实验流程（简要步骤）
标准品稀释：梯度稀释（0、0.156、0.312、0.625、1.25、2.5、5、10、20、50、100 ng/mL）。
加样：标准品、样本各100 μL/孔，37℃孵育1-2小时。
洗涤：洗板3-5次（300 μL/孔洗涤液）。
加检测抗体：100 μL/孔，37℃孵育1小时。
加酶标二抗（如适用）：HRP-Streptavidin（若使用生物素系统）。
显色：加TMB 100 μL/孔，避光反应15-30分钟。
终止：加终止液50 μL/孔。
检测：450 nm测OD值（参考波长630 nm）。
6. 应用领域
骨代谢研究：骨质疏松、骨折愈合中的OPN表达调控。
炎症与免疫：类风湿关节炎、动脉粥样硬化中的巨噬细胞活化。
肿瘤研究：OPN在肿瘤转移（如乳腺癌、前列腺癌）中的作用。
肾脏疾病：慢性肾病、肾结石中的OPN水平变化。
7. 注意事项
避免污染：使用无热原、无酶污染的耗材。
标准曲线：每次实验需重新绘制，避免批次差异。
样本稀释：高浓度样本（如骨组织匀浆）需预实验确定最佳稀释倍数。
复孔检测：建议每个样本做2-3个复孔，提高准确性。
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