大鼠Osteocalcinelisa试剂盒
一、试剂盒基本信息
检测目标：大鼠骨钙素（Osteocalcin, OC）
骨钙素是成骨细胞特异性分泌的非胶原蛋白，反映骨形成活性。
检测方法：双抗体夹心ELISA（酶联免疫吸附试验）
样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、骨组织匀浆液、细胞培养上清
灵敏度：通常 ≤0.1 ng/mL（高灵敏度可检测低丰度样本）
检测范围：0.5–50 ng/mL（覆盖生理及病理浓度）
特异性：特异性识别大鼠OC，与人、小鼠OC交叉反应低（需确认试剂盒说明）
产品名称 | 大鼠Osteocalcinelisa试剂盒 | 货号 | XG-R1486 |
英文名称 | RatOsteocalcin ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
二、实验原理
捕获抗体：微孔板预包抗大鼠OC抗体，与样本中的OC结合。
检测抗体：加入生物素或HRP标记的二抗，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。
信号放大：链霉亲和素-HRP催化TMB显色（蓝色→黄色）。
定量分析：450 nm测OD值，通过标准曲线计算OC浓度。
三、试剂盒核心组分
组分 说明
预包被96孔板 抗大鼠OC抗体固定化，即用型
骨钙素标准品 重组大鼠OC（冻干粉，需复溶稀释）
HRP标记检测抗体 生物素化或直接酶标
TMB显色液 避光保存，现用现配
终止液（2M HSO） 终止反应，稳定颜色
洗涤缓冲液（20×） PBS含Tween-20，需稀释使用
四、操作流程（简化版）
标准品制备：稀释至0.5、2、5、10、20、50 ng/mL梯度。
加样孵育：样本/标准品加入孔中，37℃孵育1–2小时。
洗涤：洗板3–5次，去除未结合蛋白。
二抗孵育：加入HRP标记抗体，37℃孵育1小时。
显色：加TMB反应10–15分钟（避光）。
终止与检测：加终止液，15分钟内测OD450 nm。
五、典型应用场景
骨代谢研究：
评估骨质疏松症、骨折愈合模型中的骨形成活性。
检测成骨细胞分化标志物（如结合ALP、CTX-1等指标）。
内分泌调控：
研究OC与糖代谢的关系（OC可调节胰岛素敏感性）。
药物开发：
筛选促进骨形成的药物（如甲状旁腺激素类似物）。
六、注意事项
样本处理：
血清/血浆需离心去除颗粒，避免反复冻融（分装保存）。
骨组织需匀浆后离心取上清。
实验优化：
高浓度样本需稀释后检测，避免超出标准曲线范围。
显色时间过长可能导致背景升高。
数据可靠性：
复孔检测，计算CV值（建议<10%）。
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