大鼠sTNFR2/TNFRS1Belisa试剂盒
试剂盒基本信息

检测目标:大鼠可溶性肿瘤坏死因子受体2(sTNFR2/TNFRSF1B)
生物学作用:sTNFR2是TNF-α的天然拮抗剂,调节炎症反应,与自身免疫病、代谢综合征等相关。
检测方法:双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验)
产品名称 | 大鼠sTNFR2/TNFRS1Belisa试剂盒 | 货号 | XG-R1494 |
英文名称 | RatsTNFR2/TNFRS1B ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
样本类型:
血清(推荐)
血浆(EDTA/肝素抗凝)
细胞培养上清(如巨噬细胞、脂肪细胞)
灵敏度:通常 ≤5 pg/mL(高灵敏度检测低丰度样本)
检测范围:15–2000 pg/mL(覆盖生理及病理浓度)
特异性:特异性识别大鼠sTNFR2,与人、小鼠TNFR2交叉反应低(需确认说明书)。
二、实验原理

捕获抗体:微孔板预包被抗大鼠sTNFR2单抗,结合样本中的sTNFR。
检测抗体:加入生物素化或HRP标记的二抗,形成“抗体-抗原-抗体”复合物。
信号放大:链霉亲和素-HRP催化TMB显色(蓝色→黄色)。
定量分析:450 nm测OD值,标准曲线计算sTNFR2浓度。
三、试剂盒核心组分

组分 说明
预包被96孔板 抗大鼠sTNFR2抗体固定化
sTNFR2标准品 重组大鼠sTNFR2(冻干粉,需复溶)
HRP标记检测抗体 生物素化或直接酶标
TMB显色液 避光保存,现用现配
终止液(2M HSO) 终止反应,稳定颜色
洗涤缓冲液(20×) PBS含Tween-20,需稀释使用
四、操作流程(简化版)

标准品制备:梯度稀释(0、15、50、200、800、2000 pg/mL)。
加样孵育:样本/标准品加入孔中,37℃孵育1–2小时。
洗涤:洗板3–5次(避免残留)。
二抗孵育:加入HRP标记抗体,37℃孵育1小时。
显色:加TMB避光反应10–15分钟。
终止与检测:加终止液,15分钟内测OD450 nm。
五、典型应用场景

炎症与免疫研究:
评估类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)模型中的sTNFR2水平。
代谢疾病:
研究肥胖、胰岛素抵抗中TNF-α/sTNFR2的调控关系。
神经退行性疾病:
检测阿尔茨海默病、多发性硬化模型中神经炎症标志物。
六、关键注意事项

样本处理:
血清/血浆采集后需尽快分离(2小时内离心,避免反复冻融)。
细胞培养上清需去除碎片(0.22 μm过滤或离心)。
实验优化:
高浓度样本需稀释后检测,避免超出标准曲线范围。
数据可靠性:
建议复孔检测,CV值<10%。
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