大鼠基质金属蛋白酶2(MMP-2)elisa试剂盒1. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠MMP-2的活性形式（62kDa）和酶原形式（72kDa）。预包被抗大鼠MMP-2单抗（靶向纤维连接蛋白结构域）捕获样本中的MMP-2，生物素标记的二抗（识别催化结构域）通过链霉亲和素-HRP系统催化TMB显色，450nm吸光度值与MMP-2浓度正相关。
产品名称
大鼠基质金属蛋白酶2(MMP-2)elisa试剂盒
货号
XG-R1552
英文名称
Rat MMP-2 ELISA Kit
规格
48T\96T
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 高亲和力单抗（Kd=0.15nM）
重组标准品 0-50ng/mL -80℃ 活化型MMP-2（含Zn2/Ca2）
组织裂解液 20mL -20℃ 含0.1% Triton X-114
血浆稳定剂 5mL 4℃ 含EDTA/BB94抑制剂
明胶酶底物 1mL -20℃ 荧光标记明胶（验证用）
3. 性能参数
检测范围：0.156-10ng/mL（可扩展至50ng/mL）
灵敏度：0.05ng/mL（基于3SD空白值）
样本兼容性：
最佳：肿瘤组织匀浆（1:5稀释）
适用：血浆（柠檬酸盐抗凝）、细胞培养上清
交叉反应：
大鼠MMP-2：100%
MMP-9：<0.5%
MMP-14：<0.1%
精密度：
批内CV：3.8-5.6%
批间CV：6.9-8.7%
4. 样本处理规范
4.1 肿瘤组织处理
取50mg瘤体边缘组织
加入450μL冷裂解液
组织研磨仪匀浆（4℃，40Hz，30秒）
4℃ 12000×g离心20分钟
4.2 血浆采集
使用3.2%柠檬酸钠管（1:9抗凝）
立即冰浴，4℃ 3000×g离心15分钟
分装后-80℃保存（避免反复冻融）
4.3 活性验证
阳性对照：HT1080细胞培养上清
阴性对照：加入10mM EDTA的样本
5. 实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、0.156、0.312、0.625、1.25、2.5、5、10ng/mL
复溶液：含5mM CaCl的TBS
关键步骤控制
孵育条件：37℃恒温摇床（200rpm）
洗板程序：自动洗板机（350μL/孔×5次）
显色终止：1M HCl（更稳定终止）
质控标准
空白OD值：≤0.05
最低检测限：≥0.15ng/mL
稀释线性：85-115%回收率
6. 主要应用方向
肿瘤转移研究：基底膜侵袭模型
心血管疾病：动脉粥样硬化斑块稳定性
纤维化疾病：肝/肺纤维化评估
创伤修复：创面再上皮化监测
7. 注意事项
实验设计
推荐采样部位：肿瘤侵袭前沿
必须设置：正常组织对照
干扰控制
避免使用肝素抗凝血（影响酶活性）
高脂样本需超速离心（12000×g，30分钟）
数据分析
推荐四参数logistic曲线拟合
组织数据需用总蛋白校正（ng/mg）
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