样本处理
血清/血浆：采集后离心（3000 rpm, 10分钟），分装保存于-20℃（避免反复冻融）。
组织匀浆：按1:9比例加入PBS匀浆，离心取上清。
细胞上清：离心去除沉淀后直接检测或冻存。
产品名称 | 大鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒 | 英文名称 | RatOPN elisa kit |
分类 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 | 0.625ng/mL-40ng/mL |
灵敏度 | 0.3125ng/mL | 货号 | PR8378 |
检测方法：双抗体夹心法（ELISA）
用途：定量检测大鼠血清、血浆、细胞上清液或组织匀浆中的OPN蛋白浓度（科研用途，非临床诊断）。
试剂盒组成
预包被微孔板：96孔板（或48孔板），包被抗大鼠OPN单克隆抗体。
标准品：重组大鼠OPN冻干粉（6浓度梯度，需复溶）。
检测抗体：HRP标记的抗大鼠OPN多克隆抗体。
底物溶液：TMB显色液。
终止液：2M硫酸溶液。
洗涤缓冲液：20×浓缩PBS-Tween。
样本稀释液：缓冲盐溶液。
检测步骤
标准品稀释：按说明书梯度稀释至0.5–100 ng/mL。
加样：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。
加检测抗体：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育60分钟。
显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。
终止与读数：加终止液后，450 nm波长测定OD值。
结果计算
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。
通过曲线方程计算样本中OPN浓度。
注意事项
保存条件：未开封试剂盒2–8℃保存，复溶后标准品需分装冻存。
有效期：6个月（见外包装标签）。
交叉反应：与人、小鼠OPN无显著交叉反应。
灵敏度：检测下限≤0.1 ng/mL。
技术参数
批内变异系数：＜10%
批间变异系数：＜15%
线性范围：0.5–100 ng/mL
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