概述
规格:96T/48T(微孔板配置)
保存条件:2-8℃避光保存
保质期:6个月(以实际批次标签为准)
适用样本:大鼠血清、血浆、细胞培养上清液等
产品名称 | 大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒 | 英文名称 | RatLIF elisa kit |
分类 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 | 7.5pg/mL-480pg/mL |
灵敏度 | 3.75pg/mL | 货号 | PR8851 |

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被抗大鼠LIF抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经温育和洗涤后,加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下呈蓝色,酸化后转为黄色,其吸光度(OD值)与样本中LIF浓度正相关。通过标准曲线计算目标浓度。
试剂盒组成

预包被微孔板:96孔或48孔(2-8℃保存)
标准品:冻干粉或液体(浓度范围示例:0-2000 pg/mL)
标准品稀释液:1.5 mL ×1瓶
酶标试剂:HRP标记抗体(3 mL/6 mL)
样品稀释液:3 mL/6 mL
显色剂A/B液:各3 mL/6 mL
终止液:1×10 mL
洗涤缓冲液(20×浓缩):需按比例稀释
封板膜、说明书、密封袋
样本处理
血清:全血静置30分钟后离心(3000 rpm,10分钟),避免溶血。
血浆:EDTA/肝素抗凝,离心(3000 rpm,30分钟)取上清。
细胞上清:离心(3000 rpm,10分钟)去除颗粒物。
注:样本需分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
操作步骤

标准品稀释:按说明书梯度稀释至目标浓度。
加样:每孔加入样本或标准品50 μL,随后加入酶标试剂50 μL(空白孔除外)。
温育:37℃孵育60分钟,洗板5次。
显色:每孔加显色剂A/B各50 μL,避光反应15分钟。
终止:加入终止液50 μL,15分钟内测定OD450 nm。
结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线(推荐四参数拟合)。
样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数(若适用)。
注意事项

试剂盒仅限科研使用,不可用于临床诊断。
避免交叉污染,不同批次试剂不可混用。
若样本浓度超出标准曲线范围,需调整稀释比例重新检测。
实验环境需符合生物安全要求,废弃物按规范处理。
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关键字: 大鼠白血病抑制因子;LIF;ELISA试剂盒;
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