商品属性
产品名称 | 大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 | 英文名称 | RatACTH elisa kit |
检测范围 | 1.25pg/mL-80pg/mL | 货号 | PR10700 |
用途
本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆或细胞上清液等样本中的促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,仅限科学研究使用,不可用于临床诊断。
检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将纯化的大鼠ACTH抗体包被于微孔板,形成固相抗体。依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤后加入底物TMB显色,在过氧化物酶催化下产生颜色反应,颜色深度与样本中ACTH浓度呈正相关。最终用酶标仪测定450 nm波长下的吸光度(OD值),通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
48孔配置
酶标包被板:12孔×4条
标准品(6管):浓度梯度为80、40、20、10、5、2.5 ng/L
20倍浓缩洗涤液:25 mL
样本稀释液:6 mL
显色剂A液/B液:各6 mL
终止液:6 mL
酶标试剂:6 mL
说明书、封板膜、密封袋
96孔配置
(组分数量按比例增加,具体以实际包装为准)
需自备器材
37℃恒温箱
450 nm滤光片酶标仪
精密移液器及一次性吸头
蒸馏水
离心机(3000 rpm)


样本处理
血清:采集血液后静置30分钟,3000 rpm离心10分钟,避免溶血。
血浆:使用EDTA/肝素抗凝管,3000 rpm离心30分钟取上清。
细胞上清液:离心去除颗粒物后直接检测或-20℃保存(避免反复冻融)。
操作步骤
平衡:试剂盒室温平衡30分钟。
配液:20倍洗涤液按1:19稀释为工作浓度。
加样:
标准品孔:加入梯度浓度标准品50 μL。
样本孔:加入待测样本50 μL。
空白孔:仅加样本稀释液。
孵育:37℃反应30分钟,洗涤5次。
显色:每孔加显色剂A/B各50 μL,37℃避光反应15分钟。
终止:加入终止液50 μL,15分钟内测定OD值。
计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度。
注意事项
试剂使用前需摇匀,避免反复冻融。
不同批号试剂不可混用。
显色时间需严格控制,终止后应立即检测。
储存条件
未开封试剂盒2-8℃保存,有效期6个月;开封后酶标板需密封防潮。
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