人白细胞介素1(IL-1)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液中的IL-1水平。通过包被抗人IL-1单克隆抗体的微孔板捕获样本中的IL-1，加入生物素化检测抗体形成复合物，再结合辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素。经底物TMB显色后，在450 nm波长下测定吸光度（OD值），其与IL-1浓度呈正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成

96孔预包被酶标板（2–8℃密封保存）

标准品（冻干粉，10 ng/瓶，复溶后浓度为10 ng/mL）

酶标抗体工作液（HRP标记，12 mL）

生物素化抗体工作液（12 mL）

10×标本稀释液（12 mL）

20×浓缩洗涤液（50 mL，使用前需稀释）

TMB底物工作液（12 mL）

终止液（12 mL，酸性溶液）

封板膜、密封袋及说明书

样本处理与保存

血清/血浆：采集后需离心（3000 rpm，10分钟），避免溶血或反复冻融。短期保存于2–8℃（48小时内），长期需-20℃或-70℃冻存。

细胞上清液：离心去除颗粒物后分装冻存。

组织匀浆：按比例加入生理盐水匀浆，离心取上清。

操作步骤

标准品配制：用1 mL蒸馏水复溶标准品，梯度稀释至所需浓度。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品，37℃孵育60分钟，洗涤后加入生物素化抗体。

显色与终止：加入TMB底物避光显色15分钟，终止后30分钟内测定OD值。

注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

洗涤需彻底，避免交叉污染。

不同批次试剂不可混用。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

性能参数

检测范围：通常为15.6–1000 pg/mL（具体以实际标准曲线为准）。

灵敏度：<5 pg/mL。

特异性：不与IL-1α/β亚型或其他细胞因子交叉反应。

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