预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附法(ELISA),用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)的含量,仅限体外研究使用。
产品名称 | 人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒 | 英文名称 | human IGFBP-4 elisa kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 2.5ng/mL-160ng/mL |
灵敏度 | 1.25ng/mL | 货号 | PH23852 |

实验原理

采用双抗体夹心法:
包被:微孔板预包被纯化的抗IGFBP-4抗体作为固相载体。
反应:依次加入待测样本或标准品、生物素化抗IGFBP-4抗体、HRP标记的亲和素,形成复合物。
显色:经洗涤后加入底物TMB,在过氧化物酶催化下显蓝色,酸性终止后转为黄色。颜色深度与样本中IGFBP-4浓度呈正相关。
检测:于450 nm波长测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成

酶联板:96孔(预包被抗体)。
标准品(冻干粉):2瓶,每瓶复溶后浓度为400 ng/ml,需用样品稀释液梯度稀释为以下浓度:
400 ng/ml、200 ng/ml、100 ng/ml、50 ng/ml、25 ng/ml、12.5 ng/ml、6.25 ng/ml,稀释液作为0 ng/ml空白对照。
注:稀释需在临用前15分钟内完成,避免直接孔内稀释。
操作注意事项

标准品复溶需静置10分钟以上,充分混匀。
洗涤步骤需彻底,避免非特异性结合干扰。
显色时间需严格控制,终止后30分钟内完成检测。
结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过四参数拟合方程计算样本浓度。
储存及有效期
未开封试剂盒保存于2–8°C,避免反复冻融标准品。
复溶后的标准品需分装冻存,避免反复冻融。
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