检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被人γ干扰素（IFN-γ）抗体的微孔板中依次加入待测样本、标准品及辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，经温育和充分洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色产物，酸化后变为黄色。颜色的深浅与样本中IFN-γ浓度呈正相关。通过酶标仪测定450 nm波长处的吸光度（OD值），依据标准曲线计算样本浓度。
产品名称 | 人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 | 英文名称 | human IFN-γ elisa kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 12.5pg/mL-800pg/mL |
灵敏度 | 6.25pg/mL | 货号 | PH23893 |
样本要求
血清：采集于无热原、无内毒素的试管中，避免溶血或反复冻融。离心后取上清（建议3000 rpm离心10分钟）。
血浆：使用EDTA或肝素抗凝剂，离心分离血浆。
细胞上清液：去除颗粒物后直接检测或-20℃/-80℃保存。
试剂盒组成
预包被微孔板
IFN-γ标准品（浓度梯度）
HRP标记检测抗体
洗涤缓冲液（浓缩液）
TMB显色底物
终止液（酸性溶液）
封板膜、说明书
操作步骤
标准品稀释：按说明书梯度稀释。
加样：每孔加入样本或标准品，37℃孵育30-60分钟。
洗涤：弃液后使用洗涤缓冲液洗板5次。
加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。
显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。
终止与检测：加入终止液，30分钟内测定OD450值。
注意事项
实验前需平衡所有试剂至室温（20-25℃）。
避免反复冻融标准品或样本。
严格控制孵育时间和温度，洗涤需彻底以减少非特异性结合。
不同批号试剂不可混用。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合（或对数拟合）计算样本浓度。
性能参数
灵敏度：通常≤0.1 μg/L。
检测范围：1-100 μg/L（具体参考标准曲线）。
特异性：与人其他干扰素亚型（如IFN-α/β）无交叉反应。
储存条件
未开封试剂盒2-8℃保存，有效期12个月；开封后微孔板需密封防潮。
应用范围
本试剂盒适用于科研用途，不可用于临床诊断。
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