预期用途
本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或其他相关液体样本中胃泌素释放肽（GRP）的含量，适用于科研用途。
产品名称 | 人胃泌素释放肽(GRP)ELISA试剂盒 | 英文名称 | human GRP elisa kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 0.9375pg/mL-60pg/mL |
灵敏度 | 0.46875pg/mL | 货号 | PH24526 |
实验原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）：
微孔板预包被纯化的抗人GRP抗体，形成固相抗体。
加入待测样本或标准品，样本中的GRP与固相抗体结合。
依次加入生物素化抗人GRP抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成复合物。
洗涤后加入底物TMB显色，在HRP催化下产生蓝色产物，酸性终止后转为黄色。
通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），标准曲线法计算样本中GRP浓度。
试剂盒组成
预包被酶联板：96孔（可拆卸）。
标准品：冻干粉2瓶（10,000 pg/ml），临用前以稀释液复溶并梯度稀释（5,000 pg/ml至156 pg/ml）。
生物素化抗体：1瓶。
HRP标记亲和素：1瓶。
浓缩洗涤液（20×）：20 mL/瓶，需稀释后使用。
TMB显色液：避光保存。
终止液（酸性溶液）：1瓶。
样本稀释液：用于标准品复溶及样本预处理。
样本要求
血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，避免反复冻融。
其他体液（如脑脊液、尿液）：需根据实验需求优化处理。
操作步骤
标准品制备：复溶后梯度稀释，静置15分钟内使用。
加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃液后加洗涤液洗板5次。
加生物素化抗体：每孔100 μL，37℃孵育60分钟。
加酶结合物：洗涤后加入HRP标记亲和素，37℃反应30分钟。
显色与终止：加入TMB避光显色15分钟，终止后30分钟内检测。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过拟合方程计算样本浓度。
注意事项
试剂盒需2-8℃保存，复溶后标准品避免反复冻融。
避免交叉污染，不同步骤更换吸头。
显色时间需严格控制，终止后颜色稳定性有限。
性能参数
检测范围：156–10,000 pg/mL。
灵敏度：<50 pg/mL。
批内/批间变异系数：均<10%。
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