商品属性
产品名称 | 人二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒 | 英文名称 | human DAO elisa kit |
检测范围 | 0.375U/mL-24U/mL | 货号 | PH25753 |
预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液及其他生物体液中的二胺氧化酶（DAO）含量。DAO是一种催化二胺类物质（如组胺、腐胺）氧化的细胞内酶，主要分布于小肠黏膜绒毛，其活性与黏膜细胞功能及绒毛高度密切相关，可作为小肠黏膜结构与功能的生物标志物，亦与某些肿瘤发生相关。
检测原理
双抗体夹心法：
包被：微孔板预包被抗人DAO单克隆抗体。
结合：样本中的DAO与包被抗体结合后，加入生物素化抗人DAO抗体形成复合物。
信号放大：辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与生物素结合，催化底物TMB显色（蓝色→黄色）。
检测：450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算DAO浓度。
一步法（部分试剂盒）：
直接加入HRP标记检测抗体，简化温育步骤，显色原理相同。
试剂盒组成（2-8℃保存）
预包被酶标板：96孔
酶标抗体工作液：12 mL
标本稀释液（10×）：12 mL
浓缩洗涤液（20×）：50 mL
标准品：10 U/瓶（冻干粉或液体）
底物（TMB）、终止液、封板膜等
样本处理
血清：无菌采血后3000 rpm离心10分钟，避免溶血或反复冻融。
血浆：建议使用EDTA/肝素抗凝，3000 rpm离心30分钟取上清。
细胞上清液：离心去除颗粒后分装保存于-80℃。
操作步骤
标准品稀释：按说明书梯度稀释。
加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃温育1小时。
洗涤：用洗涤液洗板5次，拍干。
加检测抗体：加入生物素化抗体或HRP标记抗体，37℃温育30分钟。
显色：加入TMB底物，避光反应15分钟，终止后读取OD值。
注意事项
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融标准品。
不同批次试剂不可混用，样本需避免细菌污染。
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