检测原理
采用双抗体夹心ELISA法。微孔板预包被抗人IL-7抗体,样本中的IL-7与抗体结合后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体形成复合物,通过底物显色反应测定450nm波长下的吸光度(OD值),计算IL-7浓度。
产品名称
人白介素7(IL-7)ELISA试剂盒
英文名称
Human IL-7 ELISA Kit
分类
Human/人Elisa试剂盒
检测范围
15.625pg/mL-500pg/mL
灵敏度
7.8125pg/mL
货号
PH33014
操作步骤
试剂准备
取出试剂盒,室温平衡20分钟;标准品需按说明书稀释至系列浓度。
加样
标准品孔:加入50μL不同浓度标准品。
样本孔:加入10μL待测样本+40μL稀释液(或直接加入50μL样本,依说明书调整)。
空白孔:仅加稀释液或PBS。
孵育
每孔加入100μL HRP标记抗体(空白孔除外),37℃孵育60分钟。
洗涤
弃液体,拍干后每孔加满洗涤液,静置1分钟,重复洗板5次。
显色与终止
加入底物A/B各50μL,37℃避光反应15分钟。
加入50μL终止液,15分钟内测定OD450值。
技术参数
检测范围:通常为15.6-1000 pg/mL。
灵敏度:≤5 pg/mL。
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清液(需避免溶血或反复冻融)。
交叉反应:与人IL-7特异性结合,无显著交叉反应。
注意事项
实验前确保移液器校准,避免气泡干扰。
洗涤需彻底,防止非特异性结合。
显色时间需严格控制,避免过度反应。
若样本浓度过高,需适当稀释后复测。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度。
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