检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC-ELISA）。通过抗人IL-6单克隆抗体预包被酶标板，样本中的IL-6与固相抗体结合后，加入生物素化抗人IL-6抗体形成复合物，再与辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素结合。加入TMB底物显色后，终止反应并在450 nm波长下测定吸光度（OD值），IL-6浓度与OD值呈正比，通过标准曲线定量样本中IL-6含量。
适用范围
适用于检测人血清、血浆（EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等生物样本中的IL-6含量。
产品名称 | 人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human IL-6 ELISA Kit |
分类 | Human/人Elisa试剂盒 | 检测范围 | 62.5pg/mL-2000pg/mL |
灵敏度 | 31.25pg/mL | 货号 | PH33016 |
试剂盒组成
96孔预包被酶标板
标准品（20 ng/瓶）：2瓶，需稀释后使用
酶标抗体工作液（HRP标记）：12 mL
生物素化抗体工作液：12 mL
10×标本稀释液：12 mL（使用前需1:10稀释）
20×浓缩洗涤液：50 mL（使用前需1:20稀释）
TMB底物工作液：12 mL
终止液：12 mL
封板膜
样本处理与保存
样本收集：
血清：室温血液凝固后离心（1000×g，20分钟）分离血清。
血浆：抗凝全血离心后取上清（避免溶血）。
细胞培养上清：离心去除颗粒后检测。
保存条件：
2~8℃可保存48小时，长期保存需分装并于-20℃或-70℃冻存，避免反复冻融。
操作步骤
试剂准备：
稀释标准品：按说明书梯度稀释（如0.5、1、2、4、8、16 ng/mL）。
稀释洗涤液：20×浓缩液按1:20比例用蒸馏水稀释。
加样与孵育：
每孔依次加入标准品或样本100 μL，37℃孵育90分钟。
洗涤后加入生物素化抗体工作液100 μL，37℃孵育60分钟。
洗涤后加入酶标工作液100 μL，37℃避光孵育30分钟。
显色与终止：
加入TMB底物100 μL，避光显色15~30分钟。
加入终止液50 μL，30分钟内测定OD值（450 nm）。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过曲线方程计算样本中IL-6浓度。
注意事项
试剂盒需2~8℃保存，使用前平衡至室温。
避免交叉污染，不同样本需更换吸头。
显色时间需严格控制，避免过度反应。
若样本浓度超出标准曲线范围，需进一步稀释后复测。
性能参数
灵敏度：<0.1 ng/mL
检测范围：0.5~16 ng/mL
批内/批间变异系数：<10%
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