产品名称
人白介素5(IL-5)ELISA试剂盒
英文名称
Human IL-5 ELISA Kit
分类
Human/人Elisa试剂盒
检测范围
31.25pg/mL-1000pg/mL
灵敏度
15.625pg/mL
货号
PH33017
规格:48T/96T(48孔或96孔微孔板)
保存条件:2-8℃冷藏,避免冻存;试剂盒开封后未使用的板条需密封保存于4℃。
检测原理
采用双抗体夹心法:
预包被抗人IL-31抗体捕获样本中的IL-31抗原。
加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体形成复合物。
通过底物显色反应(OD值)定量IL-31浓度。
操作步骤
试剂准备
室温平衡20-30分钟,标准品需提前复溶。
配制洗涤液(按说明书比例稀释)。
加样
标准品孔:加入梯度浓度标准品50μL。
样本孔:先加待测样本10μL,再加稀释液40μL(终体积50μL)。
空白孔:仅加稀释液或蒸馏水。
孵育
每孔加入HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
洗涤
弃液后拍干,每孔加满洗涤液,静置1分钟,重复洗板5次。
显色与终止
加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分钟。
加入终止液50μL,反应终止后15分钟内测定450nm波长OD值。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线。
通过样本OD值计算IL-31浓度(pg/mL)。
注意事项
实验前需校准移液器,确保加样精度。
避免反复冻融样本,建议分装保存于-20℃以下。
显色时间需严格控制,避免过度反应。
复孔检测可减少误差,建议每组设2-3个复孔。
性能参数
检测范围:通常为15.6-1000 pg/mL(具体以实际试剂盒为准)。
灵敏度:≤5 pg/mL。
特异性:与人IL-31无交叉反应。
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