商品属性
产品名称
人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒
英文名称
Human GAL ELISA Kit
检测范围
31.25pg/mL-1000pg/mL
货号
PH32944
预期用途
本试剂盒采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测人血清、血浆或其他生物液体中的DDC含量,适用于科研用途,不用于临床诊断。
实验原理
通过纯化的DDC抗体包被微孔板形成固相载体,依次加入样本、生物素化DDC抗体、HRP标记亲和素,经洗涤后以TMB显色。在过氧化物酶催化下,TMB显色强度与样本中DDC浓度呈正相关,通过450 nm波长测定OD值并计算浓度。
试剂盒组成
微孔板:96孔(或48孔)预包被板条。
标准品:冻干粉2瓶(4,000 pg/ml),临用前以稀释液复溶,梯度稀释为8个浓度(62.5–4,000 pg/ml)。
辅助试剂:
酶标试剂(HRP标记物)
样品稀释液、洗涤缓冲液
显色底物(TMB)、终止液
封板膜、密封袋
操作步骤
标准品配制:复溶后室温静置10分钟,涡旋混匀,按需稀释为系列浓度。
加样:每孔加入样本或标准品100 μl,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃液后加洗涤液,重复5次。
加酶标试剂:每孔加入生物素化抗体,37℃孵育60分钟。
显色:加入TMB避光反应15–30分钟,终止后30分钟内测定OD值。
结果计算
以标准品浓度(对数坐标)与OD值绘制标准曲线,通过回归方程计算样本浓度。
若样本需稀释,最终浓度需乘以稀释倍数。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温,避免反复冻融。
标准品现配现用,剩余不可保存。
不同批次试剂不可混用,避免交叉污染。
终止后显色会逐渐衰减,需及时检测。
储存及有效期
未开封试剂盒:2–8℃保存,有效期6个月。
开封后:微孔板需密封防潮,酶标试剂避免光照。
性能参数
灵敏度:≤25 pg/ml
检测范围:62.5–4,000 pg/ml
精密度:板内变异系数<10%,板间<15%
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