商品属性
产品名称
人血管内皮生长因子165(VEGF165)ELISA试剂盒
英文名称
Human VEGF165 ELISA Kit
检测范围
62.5pg/mL-2000pg/mL
货号
PH32969
产品用途
本试剂盒用于定量检测人血清、细胞上清液及相关液体样本中血管内皮生长因子165(VEGF165)的浓度,适用于科研领域。
实验原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。微孔板预包被纯化的人VEGF165抗体,形成固相抗体。样本中的VEGF165与固相抗体结合后,再与辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤去除未结合物,加入底物TMB显色,在HRP催化下产生蓝色产物,酸化后转为黄色。颜色深度与样本中VEGF165浓度呈正相关,通过450 nm波长测定吸光度(OD值),依据标准曲线计算浓度。
主要组成
预包被微孔板
VEGF165标准品
HRP标记检测抗体
TMB显色液
终止液
洗涤缓冲液(浓缩)
样本要求
类型:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆等。
保存:2-8℃短期保存,长期需分装冻存于-20℃以下,避免反复冻融。
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释。
加样:每孔加入样本或标准品,37℃孵育。
洗涤:弃液体,洗涤缓冲液洗板5次。
加酶标抗体:每孔加入HRP标记抗体,37℃孵育。
显色:加入TMB底物,避光反应后终止。
检测:酶标仪450 nm读取OD值。
注意事项
安全防护:避免直接接触终止液及显色底物,操作时穿戴防护用具。
实验环境:避免强光照射,室温波动需控制在18-25℃。
试剂保存:未使用组分需按标签要求(2-8℃或-20℃)保存,避免反复冻融。
质量控制:建议每批次实验设置复孔及质控样本。
局限性
仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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