商品属性
产品名称 | 人摄食抑制因子1(NES1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human NES1 ELISA Kit |
检测范围 | 617.3pg/mL-50,000pg/mL | 货号 | PH32980 |
产品概述
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、细胞上清液等样本中的NES1蛋白含量。检测原理基于抗原-抗体特异性结合及酶催化底物显色反应，灵敏度可达pg/ml级别，重复性良好。
自备仪器与试剂
仪器：酶标仪（450nm波长）、离心机、恒温孵育箱（37℃）、微量加样器及吸头。
试剂：蒸馏水（配制标准品及洗涤液）、去离子水（稀释浓缩洗涤液）。
试剂盒组分与配制
标准品：使用前每管加入400μl蒸馏水溶解。
浓缩洗涤液：按1:20比例用重蒸水稀释，若有结晶需加热溶解。
其他组分：预包被酶标板、底物液、终止液（含2M硫酸）、样品稀释液等。
操作步骤
样本准备：
血清：室温凝固30分钟后离心（1000×g，15分钟），分装保存于-20℃。
血浆：EDTA抗凝，30分钟内离心（1000×g，15分钟），避免反复冻融。
实验流程：
平衡试剂：实验前20分钟将试剂盒置于室温（20-25℃）。
标准曲线制备：
设8孔，首孔加入100μl标准品，倍比稀释至第7孔，第8孔为空白对照。
加样与孵育：每孔加入100μl样本或标准品，37℃孵育后洗涤。
显色与终止：每孔加入100μl底物液（37℃避光反应5-10分钟），50μl终止液混匀。
检测：450nm波长读取吸光度（OD值），需扣除空白值。
结果计算
以标准品浓度（1000-15.62 pg/ml）为X轴（对数坐标），OD值为Y轴绘制标准曲线。
根据样本OD值从曲线中计算NES1浓度。
注意事项
质量控制：建议所有样本及标准品做复孔，每次实验需重新制备标准曲线。
试剂保存：
板条开封后需密封防潮，未用板条保存于4℃。
底物液若变蓝则失效，禁止使用。
安全提示：
终止液含2M硫酸，避免与叠氮化钠废物混合。
不同批号试剂不可混用。
操作规范：避免接触酶标板底部，防止读数偏差。
技术原理
基于抗原-抗体特异性结合，通过酶标记放大信号，最终显色强度与样本中NES1浓度成正比。
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