检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测小鼠样本中的白细胞介素17(IL-17)。将特异性抗小鼠IL-17抗体预包被于微孔板中,加入待测样本或标准品后,IL-17与固相抗体结合。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤后,加入底物TMB显色,在过氧化物酶催化下产生蓝色产物,酸化后转为黄色。颜色的深浅与样本中IL-17浓度呈正相关,通过450 nm波长测定吸光度(OD值),依据标准曲线计算浓度。
产品名称 | 小鼠白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse IL-17 ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 |
|
灵敏度 |
| 货号 | PM33080 |

样本要求

血清:采集血液后静置30分钟,3000×g离心10分钟,避免溶血或反复冻融。
血浆:建议使用EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝,3000×g离心30分钟取上清。
细胞上清液:离心去除细胞碎片(3000×g,10分钟)。
组织匀浆:按重量体积比(如1:9)加入生理盐水匀浆,3000×g离心10分钟取上清。
注意:样本需分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
试剂盒组成

预包被微孔板(48孔或96孔配置)
IL-17标准品(浓度梯度)
HRP标记检测抗体
洗涤缓冲液(20×浓缩液)
TMB显色底物
终止液(酸性溶液)
说明书及标准曲线模板
操作步骤

标准品稀释:按说明书梯度稀释至工作浓度。
加样:每孔加入样本或标准品100 μL,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃液后加入洗涤液,静置30秒后弃去,重复5次。
加检测抗体:每孔加入HRP标记抗体100 μL,37℃孵育60分钟。
显色:洗涤后加入TMB底物100 μL,避光反应15-30分钟。
终止与检测:加入终止液50 μL,15分钟内测定450 nm OD值。
注意事项

不同批次试剂不可混用。
避免底物接触金属或氧化剂。
若样本浓度超出标准曲线范围,需适当稀释后复测。
计算与结果
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,通过四参数拟合(或对数拟合)计算样本浓度。
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