预期用途

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),定量检测小鼠血清、血浆或其他生物液体中的组织因子(TF)含量,适用于科研用途,不用于临床诊断。
产品名称 | 小鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse TF ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 | 3.125ng/mL-100ng/mL |
灵敏度 | 1.5625ng/mL | 货号 | PM33083 |

实验原理

包被:抗小鼠TF抗体预包被于酶标板孔内。
结合:样本中的TF与包被抗体结合,再依次加入生物素化检测抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,形成复合物。
显色:加入TMB底物后,在HRP催化下产生蓝色产物,终止液转化为黄色,颜色深度与TF浓度成正比。
检测:450 nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算浓度。
试剂盒组成

| 组分 | 规格/数量 | 备注 |
| 预包被酶标板 | 96孔 | 可拆卸,12孔×8条 |
| TF标准品 | 冻干粉×2瓶 | 临用前用样本稀释液复溶至4,000 pg/mL,梯度稀释至15.6 pg/mL |
| 生物素化检测抗体 | 1瓶(6 mL) | 需避光保存 |
| HRP标记亲和素 | 1瓶(6 mL) | |
| 显色剂(TMB A/B液) | 各6 mL | 使用前15分钟平衡至室温 |
| 20×浓缩洗涤液 | 25 mL | 稀释为1×工作液(蒸馏水定容) |
| 终止液 | 6 mL | 2M硫酸溶液 |
操作步骤

试剂准备:
标准品复溶:用1 mL样本稀释液溶解冻干粉,静置10分钟混匀,随后梯度稀释(1,000→15.6 pg/mL)。
洗涤液配制:20×浓缩液按1:19比例稀释。
加样与孵育:
标准品孔:加入50 μL各浓度标准品。
样本孔:10 μL样本+40 μL稀释液(1:5稀释)。
37℃孵育60分钟,洗板5次。
检测:
依次加入生物素化抗体、酶结合物,每次孵育30分钟后洗涤。
加入TMB显色15分钟,终止后30分钟内测定OD450值。
注意事项

样本处理:避免反复冻融,溶血或高脂样本需离心后检测。
标准曲线:建议复孔检测,R²≥0.99方有效。
灵敏度:检测下限为15.6 pg/mL,线性范围31.25–2,000 pg/mL。
储存条件
未开封试剂盒2–8℃保存,复溶后标准品分装-20℃冻存,避免反复冻融。
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