一、核心检测信息
检测目标
特异性定量大鼠血清、胎盘组织匀浆或肿瘤微环境提取物中的 PIGF，一种糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定生物合成途径的关键酶，通过调控GPI修饰蛋白的膜定位参与血管生成、胚胎发育及肿瘤转移。
产品名称 | 大鼠磷脂酰肌醇糖生物合成类F蛋白(PIGF)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1569 |
英文名称 | RatPIGF ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
检测原理
双抗体夹心ELISA：
预包被抗大鼠PIGF单抗（靶向N端催化结构域）捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗（识别C端调控区）结合 → 超敏HRP-TMB显色系统（450nm/630nm双波长校正）。
可选功能验证：通过GPI缺失细胞（如PIGF-KO细胞）补实验证检测到的PIGF活性。
二、技术参数与验证
关键指标 技术说明
检测范围 0.1-20 ng/mL（6梯度点）
最低检测限 0.03 ng/mL（超高灵敏度）
样本兼容性 血清（避免脂血）、胎盘组织裂解液（含1% NP-40）、肿瘤外泌体提取物
特异性验证 不与大鼠PIGA、PIGK交叉
酶活性关联性 可配合GPI合成效率检测（需额外底物）
三、典型应用场景
血管生成研究
子痫前期胎盘组织中PIGF/sFlt-1比值与血管重塑异常的关联
肿瘤生物学
结直肠癌转移灶中PIGF介导的CD24（GPI锚定蛋白）膜定位机制
遗传性疾病
PIGF基因突变导致GPI缺乏症的诊断模型构建
四、操作关键要点
样本处理
外泌体样本：需通过超速离心（100,000×g, 2h）富集后裂解检测
脂血血清：建议使用脂蛋白吸附柱（如Liposorb）预处理
实验优化
高浓度样本需1:10稀释（使用含0.1% Tween-20的HEPES缓冲液）
每板设置阳性对照（过表达PIGF的HEK293细胞裂解液）
五、注意事项
干扰因素
高浓度游离肌醇（＞10mM）会竞争性抑制检测
数据解读
建议联合检测其他GPI合成酶（如PIGO）及下游锚定蛋白（如CD55）
保存规范
未开封试剂盒4℃避光保存（有效期12个月），标准品-80℃分装（含5%海藻糖）
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上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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