一、核心检测信息
检测目标
特异性定量大鼠尿液、肾组织匀浆或足细胞裂解液中的 Nephrin,一种位于肾小球足细胞裂孔隔膜(SD)的跨膜蛋白,作为肾滤过屏障的核心组分,其表达下降或结构异常与蛋白尿、糖尿病肾病及微小病变型肾病直接相关。
检测原理
双抗体夹心ELISA:
预包被抗大鼠Nephrin单抗(靶向胞外Ig样结构域)捕获目标蛋白 → 生物素标记二抗(识别胞内段)结合 → 超敏HRP-TMB显色系统(450nm/630nm双波长校正)。
特殊设计:含0.1% Triton X-100增强膜蛋白提取效率。
产品名称 | 大鼠肾足蛋白(NPHN)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1581 |
英文名称 | Rat NPHN ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
二、技术参数与验证
关键指标 技术说明
检测范围 0.2-50 ng/mL(6梯度点)
最低检测限 0.06 ng/mL(可检测早期足细胞损伤)
样本兼容性 24h尿液(需调pH至7.0)、肾皮质裂解液(含1% SDS)、原代足细胞培养上清
特异性验证 不与大鼠Podocin、CD2AP交叉
稳定性测试 尿液样本4℃保存72h回收率>95%
三、典型应用场景
糖尿病肾病研究
STZ诱导糖尿病大鼠尿Nephrin/Cr比值与肾小球基底膜增厚的相关性
药物肾毒性评估
阿霉素肾病模型中Nephrin表达动态变化与蛋白尿进展时序分析
遗传性肾病
NPHS1基因敲除大鼠的Nephrin缺失验证
四、操作关键要点
样本处理
尿液样本:需离心去除沉淀(3000×g, 10min),建议加入蛋白酶抑制剂
肾组织:优先分离肾小球(筛网法)后裂解,避免肾小管干扰
实验优化
高浓度样本需1:5稀释(使用含0.5% BSA的PBS)
每板设置阳性对照(AngII刺激的足细胞裂解液)
五、质控要求:
每板需包含:空白孔、Hook效应对照(100 ng/mL)、跨板CV<8%
六、注意事项
临床前意义
尿Nephrin>5 ng/mg Cr提示大鼠足细胞显著损伤(人类阈值≈3.5 ng/mg Cr)
联合检测建议
推荐与Podocalyxin、α-actinin-4联检评估足细胞完整性
样本保存
肾组织提取液需-80℃分装(冻融≤1次),避免反复冻融导致蛋白降解
公司正在出售的产品:
血液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶((iNOS /NOS2/mNOS))活性比色法定量检测试剂盒 | 肌球蛋白1H抗体 |
细胞PKG激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C) | PE-Cy7标记人CD127 (IL7R)单克隆抗体 |
丙酮酸待测样品处理试剂盒 | 钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白3抗体 |
组织EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR扩增检测试剂盒 | 肿瘤转移相关蛋白1抗体 |
TEM电镜免疫细胞化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒(含HRP一抗) | 髓样细胞核分化抗原抗体 |
载玻片细胞TNF ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | EB病毒核抗原-3B抗体 |
细胞CASPASE-8蛋白表达比色法定量检测试剂盒 | 硫辛酰胺脱氢酶抗体 |
磷酸二酯酶1(Phosphodiesterase 1) | 胆碱磷酸酯酶2抗体 |
细胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR扩增检测试剂盒 | 烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体 |
细胞ARG/ABL2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 6号染色体开放阅读框52抗体 |
石蜡切片细胞有丝分裂NBT显色检测试剂盒 | 赖氨酸特异性去甲基酶5B 抗体 |
蛋白样品液相法去内毒素试剂盒 | 大鼠肾足蛋白(NPHN)elisa试剂盒TWIST蛋白2抗体抗体 |
细胞表面免疫球蛋白样转录因子2重组兔单克隆抗体 | G蛋白通路抑制蛋白1抗体 |
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西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。