大鼠嗜环蛋白/亲环素A(CYPA)elisa试剂盒
一、核心检测信息
1. 检测原理
采用竞争性ELISA技术，特异性识别大鼠CYPA的肽基脯氨酰异构酶活性结构域（18kDa）。预包被重组大鼠CYPA与样本中的CYPA竞争结合生物素标记的单抗，通过链霉亲和素-HRP系统催化TMB显色，450nm吸光度值与CYPA浓度负相关。
产品名称 | 大鼠嗜环蛋白/亲环素A(CYPA)elisa试剂盒 | 货号 | XG-R1584 |
英文名称 | Rat CYPA ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 核心组分
组分 规格 保存条件 关键特性
预包被板 96T 2-8℃（含干燥剂） 重组CYPA包被（1μg/孔）
生物素-抗体 100μL -20℃（避光） 识别活性位点（克隆号：CY-103）
免疫抑制药物对照 0.5mL -20℃ 环孢素A（10μM）
细胞膜提取液 15mL 4℃ 含0.5% NP-40
氧化应激保护剂 5mL -20℃ 含1mM DTT
性能参数
检测范围：0.1-50ng/mL（可扩展至200ng/mL）
灵敏度：0.03ng/mL（基于10%抑制率）
样本兼容性：
最佳：活化T细胞裂解液
适用：血清（需1:10稀释）、脑线粒体提取物
交叉反应：
大鼠CYPA：100%
CYPB/CYPC：<0.1%
人CYPA：92%（种属保守性）
精密度：
批内CV：7.2-9.5%
批间CV：10.3-12.8%
4. 样本处理规范
4.1 淋巴细胞活化
分离脾脏T细胞（尼龙毛柱）
用ConA（5μg/mL）刺激48小时
加入膜提取液裂解细胞
4.2 线粒体提取
差速离心法分离脑线粒体
加入含DTT的保护剂
-80℃冻存（避免反复冻融）
4.3 血清处理
使用无热原采血管
4℃ 3000×g离心20分钟
分装后-80℃保存
实验操作要点
标准曲线制备
梯度稀释：0、0.1、0.5、1、5、10、25、50ng/mL
复溶液：含5mM β-巯基乙醇的PBS
关键步骤控制
竞争反应：37℃避光振荡60分钟
洗板液：含0.1% Tween-20的TBS（pH7.6）
显色终止：1M HCl（50μL/孔）
质控标准
最大结合孔OD值：≥1.5
环孢素A抑制率：≥90%（10μM）
回收率标准：85-115%
6. 主要应用方向
免疫抑制研究：环孢素A药效监测
氧化应激：缺血再灌注损伤模型
病毒感染：HIV衣壳蛋白相互作用
神经退行性疾病：线粒体功能障碍评估
注意事项
实验设计
推荐同步检测CD147（CYPA受体）
必须设置：未刺激细胞对照
干扰控制
避免使用溶血样本（影响异构酶活性）
含巯基试剂需透析去除
数据分析
采用logit-log竞争曲线拟合
线粒体数据需用蛋白含量校
公司正在出售的产品：
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关键字： 大鼠嗜环蛋白/亲环素A; CYPA ;elisa试剂盒;
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