1. 产品概述
检测目标:人乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)。
方法原理:双抗体夹心ELISA法(常见),少数竞争法。
适用样本:血清、血浆、乳汁、唾液、尿液、细胞培养上清等(需确认样本兼容性)。
产品名称 | 人Lactoferrinelisa试剂盒 | 货号 | XG-H1676 |
英文名称 | Human Lactoferrin ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 试剂盒组成
预包被板:96孔板(包被抗人LF单克隆抗体)。
标准品:重组人乳铁蛋白(浓度梯度,如0、1.56、3.12、6.25、12.5、25、50、100 ng/mL)。
检测抗体:生物素或HRP标记的抗人LF二抗。
酶结合物:链霉亲和素-HRP(若使用生物素系统)。
显色底物:TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)。
终止液:酸性溶液(如1M H?SO?)。
洗涤缓冲液:含Tween-20的PBS。
封闭液/样本稀释液:含BSA的缓冲液。
3. 检测原理
捕获:样本中LF与预包被抗体结合。
标记二抗:加入生物素/HRP标记的二抗,形成复合物。
信号放大:若为生物素系统,加入链霉亲和素-HRP。
显色:TMB在HRP催化下显蓝色,终止后变黄色。
定量:450nm测OD值,标准曲线计算浓度。
4. 关键参数
灵敏度:通常≤0.1 ng/mL(高灵敏度试剂盒可达pg级)。
检测范围:1.56–100 ng/mL(常见,不同品牌有差异)。
特异性:与人LF特异性结合,不与转铁蛋白等其他铁结合蛋白交叉反应。
重复性:批内CV <8%,批间CV <12%。
5. 操作流程(简要)
加样:标准品/样本加入预包被板,37℃孵育1–2小时。
洗涤:洗板3–5次,去除未结合物。
加二抗:加入标记抗体,孵育30–60分钟。
加酶:若为生物素系统,加入链霉亲和素-HRP。
显色:加入TMB,避光反应10–30分钟。
终止:加入终止液,颜色由蓝变黄。
检测:450nm读值(校正波长570/630nm)。
6. 应用领域
感染性疾病:LF作为炎症标志物(如细菌/病毒感染)。
新生儿健康:母乳中LF含量评估(抗菌和营养功能)。
自身免疫病:干燥综合征、炎症性肠病(IBD)等研究。
癌症研究:某些肿瘤(如乳腺癌)中LF表达异常。
7. 注意事项
样本处理:
血清/血浆:离心去除纤维蛋白,避免溶血。
乳汁/唾液:离心取上清,必要时稀释。
干扰因素:高脂血样本需澄清处理;避免反复冻融。
标准曲线:建议每板重复标准品,确保线性(R2≥0.99)。
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