人Osteocactivinelisa试剂盒

1. 概述

Osteocalcin（骨钙素）是由成骨细胞特异性分泌的非胶原蛋白，是骨形成的重要标志物。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，可高灵敏度定量检测人血清、血浆等样本中的Osteocalcin水平，适用于骨质疏松、骨代谢疾病及内分泌研究。

2. 检测原理

双抗体夹心法：预包被抗体捕获Osteocalcin，生物素标记二抗与靶蛋白结合，SA-HRP催化TMB显色。

检测范围：典型0.5-50 ng/mL（不同品牌差异）

灵敏度：<0.1 ng/mL

 3. 试剂盒组成

组分  规格/说明

预包被微孔板  抗人Osteocalcin单抗包被96孔板

标准品  重组人Osteocalcin（0-50 ng/mL梯度）

生物素化检测抗体  冻干粉，实验前需复溶

SA-HRP结合物  链霉亲和素-辣根过氧化物酶

TMB底物溶液  避光保存

终止液  2M H?SO?

20×洗涤缓冲液  PBS-Tween需稀释使用

4. 样本要求

适用样本：

血清（推荐静置30min后3000rpm离心10min）

EDTA/肝素抗凝血浆

骨组织匀浆（需特殊前处理）

保存条件：

2-8℃可存24h

-20℃避免反复冻融（≤3次）

5. 操作流程

标准品制备：用标准品稀释液梯度稀释（建议做8点曲线）

加样：100μL/孔，37℃孵育90min

洗涤：自动洗板机洗5次（手工洗板需浸泡30s/次）

加检测抗体：50μL/孔，37℃60min

加酶结合物：37℃避光反应30min

显色：TMB反应15min（精确计时）

终止检测：450nm主波长，630nm参比波长

6. 关键注意事项

样本处理：

溶血样本需注明（血红蛋白>0.5g/L需排除）

骨代谢异常患者样本可能需1:5稀释

质量控制：

每板须包含空白孔、零标准品孔

建议添加质控血清（高/中/低浓度）

标准曲线拟合：

推荐四参数logistic曲线拟合

有效范围R2≥0.990

7. 临床应用价值

骨代谢评估：

骨质疏松诊断（与β-CTX联合检测）

绝经后女性骨流失监测

治疗监测：

双膦酸盐/特立帕肽疗效评价

肾性骨营养不良评估

科研应用：

成骨细胞分化研究

糖尿病与骨代谢关联研究

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