1. 试剂盒概述
检测目标：人玻连蛋白（Vitronectin, VTN），又称血清扩散因子（S-protein），是一种多功能糖蛋白，参与细胞黏附、凝血、补体调控等过程。
检测原理：双抗体夹心ELISA（Sandwich ELISA），特异性识别人Vitronectin。
样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织裂解液等。
产品名称 | 人Vitronectinelisa试剂盒 | 货号 | XG-H1704 |
英文名称 | Human Vitronectin ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 试剂盒组成（以典型试剂盒为例）
组分 说明
预包被微孔板 抗人Vitronectin抗体包被的96孔板
标准品 重组人Vitronectin（0-1000 ng/mL梯度浓度）
检测抗体 生物素或HRP标记的抗人Vitronectin二抗
酶结合物 链霉亲和素-HRP（若检测抗体为生物素标记）
显色底物（TMB） 用于HRP催化显色
终止液 硫酸或盐酸溶液（终止反应）
洗涤缓冲液 20×浓缩液，需稀释
样本稀释液 用于稀释高浓度样本
3. 检测原理
捕获：样本中的Vitronectin与预包被在微孔板上的抗体结合。
信号放大：加入生物素标记的二抗，再结合链霉亲和素-HRP，形成“抗体-抗原-抗体-HRP”复合物。
显色：加入TMB底物，HRP催化显色（蓝色→黄色，终止后）。
检测：在450nm波长下测吸光度（OD值），计算浓度。
4. 主要应用
细胞生物学：研究Vitronectin在细胞黏附、迁移和伤口愈合中的作用。
凝血与血栓研究：评估Vitronectin在凝血系统（如结合PAI-1）中的功能。
肿瘤研究：分析Vitronectin在肿瘤微环境中的表达及作用。
免疫学：研究补体调控（如抑制MAC形成）。
5. 试剂盒特点
高灵敏度：检测下限通常为 0.1-1 ng/mL。
高特异性：仅检测人Vitronectin，不与纤维连接蛋白（Fibronectin）或其他黏附分子交叉反应。
宽检测范围：0-1000 ng/mL，覆盖生理和病理浓度（血清中正常范围：200-400 μg/mL）。
稳定性好：标准品和抗体在4℃或-20℃下可长期保存。
6. 操作步骤（简版）
标准品稀释：按说明书配制梯度浓度（如0、10、50、200、500、1000 ng/mL）。
加样：每孔加100 μL标准品或样本，37℃孵育1-2小时。
洗涤：洗板3-5次，去除未结合物质。
加检测抗体：孵育1小时，洗涤。
加酶结合物：孵育30分钟，洗涤。
显色：加入TMB反应10-15分钟（避光）。
终止：加入终止液，30分钟内测OD450nm。
7. 数据分析
使用四参数逻辑回归（4-PL）或线性回归拟合标准曲线。
样本浓度 = 根据OD值从标准曲线计算 × 稀释倍数（如有）。
8. 注意事项
样本处理：
血清/血浆需离心去除颗粒物，避免反复冻融。
细胞培养上清液需去除沉淀（如3000 rpm离心10分钟）。
实验优化：
高浓度样本需稀释至标准曲线范围内。
避免长时间暴露于室温，防止Vitronectin降解。
干扰因素：溶血或脂血样本可能影响结果。
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