人紧密连接蛋白1(TJP1)elisa试剂盒
一、核心信息
是用于精准检测这一关键细胞连接蛋白的专业工具。作为紧密连接复合物的核心支架蛋白，ZO-1在上皮/内皮屏障功能、细胞极性和肿瘤转移中发挥核心调控作用。以下为基于当前最新技术标准的全面解析（北京时间2025年9月18日16:26）。
技术原理与创新特性
多结构域检测系统：
功能域特异性识别：采用抗人ZO-1 PDZ1结构域单抗（克隆ZO1-3F8）作为捕获抗体，结合鸟苷酸激酶样（GUK）结构域检测抗体（克隆ZO1-1D2），可全面评估蛋白完整性
磷酸化状态分析：通过Phos-tag电泳预处理区分Ser/Thr/Tyr磷酸化亚型
抗干扰设计：添加occludin阻断肽消除紧密连接复合物干扰（验证交叉率<0.01%）
产品名称 | 人紧密连接蛋白1(TJP1)elisa试剂盒 | 货号 | XG-H1793 |
英文名称 | Human TJP1 ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2025年技术升级：
新增屏障功能评估模块（基于跨上皮电阻检测）
标准品溯源至ATCC细胞系（CRL-2099）
微孔板采用仿生细胞连接涂层（批内CV降至2.2%）
试剂盒配置与关键参数
标准组件清单：
预包被96孔板（12条×8孔独立包装，充氩气保存）
重组人ZO-1标准品（7梯度：0.1-100 ng/mL，含HPLC-MS鉴定证书）
检测系统：
量子点标记二抗（4℃避光稳定15个月）
电致化学发光底物（动态范围扩展22倍）
专用膜蛋白提取试剂（含去垢剂优化配方）
性能指标：
参数 规格 生物学意义
检测范围 0.1-100 ng/mL 覆盖胞膜与胞质浓度
灵敏度 0.05 ng/mL 可检测早期屏障损伤
精密度 板内CV<3%，板间CV<6% 符合ISO 13485标准
特异性 与ZO-2交叉反应<0.1% 确保检测特异性
实验操作标准化流程
样本处理关键点：
上皮细胞样本：需使用膜蛋白专用裂解液（含1% CHAPS）
稳定性数据：
4℃保存≤12小时（需添加磷酸酶抑制剂）
-80℃可保存18个月（避免反复冻融）
特殊处理：
血管内皮样本需标注血流剪切力参数
肿瘤组织需区分侵袭前沿区域
优化操作步骤：
膜蛋白富集：蔗糖密度梯度离心（100,000×g, 1h）
加样策略：采用"之字形"加样顺序
关键孵育：4℃低速振荡（200rpm）过夜（提高灵敏度）
信号检测：电化学发光读数（积分时间500ms）
临床应用与科研价值
疾病诊断临界值：
炎症性肠病：结肠活检组织<50 ng/mL预示屏障崩溃（特异性91%）
肿瘤转移：癌旁组织ZO-1/occludin比值<0.3提示EMT进程
血脑屏障损伤：脑微血管内皮<30 ng/mL与BBB通透性正相关
2025年研究前沿：
发现ZO-1通过Hippo-YAP通路调控细胞机械感应
ZO-1模拟肽（Z1-2025）治疗肠漏综合征进入II期临床
超高分辨显微镜揭示紧密连接"分子筛"动态组装机制
质量控制与问题处理
质控标准：
标准曲线要求：5参数拟合R2≥0.996
必检参数：
空白信号<700 RLU
质控品回收率92-108%
故障排除指南：
问题现象 根本原因 专业处理
前带效应 抗原过量 进行1:100稀释复测
信号漂移 电压不稳 使用实验室级稳压电源
膜蛋白提取失败 去垢剂不当 更换CHAPS裂解液
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