人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)elisa试剂盒
一、技术原理与创新特性

多功能检测系统:
多形式识别技术:采用抗人uPA A链单抗(克隆U1)作为捕获抗体,结合B链检测抗体(克隆U3)实现酶原(pro-uPA)、活性uPA和uPA-PAI-1复合物的同步检测
活性状态分析:通过氨基苯甲脒(AMBA)预处理区分游离uPA与受体结合形式
抗干扰设计:添加纤溶酶抑制剂(Aprotinin)阻断体外激活干扰(验证交叉率<0.01%)
2025年技术升级:
新增纤溶活性检测模块(基于荧光底物S-2444)
标准品溯源至WHO国际标准(NIBSC 18/272)
微孔板采用仿生细胞外基质涂层(批内CV降至2.0%)
产品名称 | 人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)elisa试剂盒 | 货号 | XG-H1813 |
英文名称 | human uPA ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
试剂盒配置与关键参数

标准组件清单:
预包被96孔板(8×12可拆,充氮包装)
重组人uPA标准品(7梯度:0.05-50 ng/mL,含质谱鉴定证书)
检测系统:
钌标记链霉亲和素(4℃避光稳定15个月)
三丙胺电化学发光底物(动态范围扩展20倍)
专用组织保存液(含广谱蛋白酶抑制剂)
性能指标:
参数 规格 临床意义
检测范围 0.05-50 ng/mL 覆盖生理和病理浓度
灵敏度 0.02 ng/mL 可检测微转移灶
精密度 板内CV<3%,板间CV<6% 符合ISO 13485标准
特异性 与tPA交叉反应<0.1% 确保检测特异性
实验操作标准化流程

样本处理规范:
血浆采集:必须使用CTAD抗凝管(抑制血小板释放)
稳定性数据:
4℃保存≤24小时(需立即添加抑制剂)
-80℃可保存1年(避免反复冻融)
特殊处理:
肿瘤组织需液氮速冻保存
伤口渗出液需离心去除细胞碎片
优化操作步骤:
激活处理:含25mM NaCl的Tris缓冲液(pH 8.8)预处理30分钟
加样策略:采用"蛇形"加样顺序减少边缘效应
关键孵育:37℃恒温振荡(700rpm)75分钟
信号检测:电化学发光读数(积分时间400ms)
临床应用与科研价值

疾病诊断临界值:
乳腺癌预后:组织>5 ng/mL预示无转移生存期缩短(HR=2.1)
肝纤维化分期:血清uPA/PAI-1比值>1.5提示F3-F4期
创伤愈合评估:创面渗出液<2 ng/mL预示延迟愈合
2025年研究前沿:
发现uPAR-uPA-integrin三元复合物调控肿瘤干细胞niche
uPA抑制剂(Upamostat)治疗胰腺癌进入III期临床
单细胞空间转录组揭示转移前微环境uPA梯度分布
质量控制与问题处理

质控标准:
标准曲线要求:5参数拟合R2≥0.996
必检参数:
空白信号<600 RLU
质控品回收率90-110%
故障排除指南:
问题现象 根本原因 专业处理
前带效应 抗原过量 进行1:50稀释复测
信号漂移 温度波动 使用带温度记录的孵育箱
背景升高 封闭不充分 增加封闭时间至2小时
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