1. 基本介绍
目标分子:嗜铬蛋白A(Chromogranin A, CHGA),属于嗜铬蛋白家族,广泛分布于神经内分泌细胞(如肾上腺髓质、胰岛β细胞、肠嗜铬细胞等)及其肿瘤组织中。
临床意义:
神经内分泌肿瘤(NETs):如嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、胰岛细胞瘤、类癌瘤等。
小细胞肺癌(SCLC):部分SCLC患者CHGA水平升高。
心血管疾病:CHGA可能参与高血压和心力衰竭的病理过程(如嗜铬细胞瘤相关高血压)。
其他:如慢性萎缩性胃炎(胃神经内分泌肿瘤风险标志物)。
产品名称 | 人嗜铬蛋白A(CHGA)elisa试剂盒 | 货号 | XG-H1832 |
英文名称 | Human CHGA ELISA Kit | 规格 | 48T\96T |
2. 检测原理
采用双抗体夹心ELISA法:
捕获抗体:微孔板上预包被抗CHGA单抗或多抗。
样本孵育:样本中的CHGA与固相抗体结合。
检测抗体:加入酶(HRP或ALP)标记的二抗,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色反应:加入TMB等底物,酶催化显色,颜色深浅与CHGA浓度成正比。
终止反应:加入终止液(如硫酸),在450nm波长下测定吸光度(OD值)。
3. 试剂盒组成
典型组分包括:
预包被微孔板(96孔,可拆)
CHGA标准品(0、10、50、100、200、500 pg/mL 或 ng/mL,依品牌不同)
样本稀释液
酶标二抗(HRP或ALP标记)
洗涤缓冲液(10×或20×浓缩液)
显色底物(TMB或OPD)
终止液(1M H?SO? 或类似)
封板膜
说明书
4. 适用样本类型
血清(推荐无溶血、无脂血)
血浆(EDTA或肝素抗凝,避免反复冻融)
组织匀浆液(需适当处理)
细胞培养上清(需离心去除碎片)
样本储存:短期可2-8℃保存,长期建议-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。
5. 操作步骤(简要流程)
标准品稀释:制备系列浓度梯度(如0、10、50、100、200、500 pg/mL)。
加样:标准品和样本加入对应孔中(通常100μL/孔),37℃孵育1-2小时。
洗涤:用洗涤液洗板3-5次,去除未结合物质。
加酶标抗体:加入HRP标记的二抗,37℃孵育30-60分钟。
显色:加入TMB底物,避光反应10-30分钟(显蓝色)。
终止:加入终止液(变黄色)。
检测:酶标仪读取450nm(参考波长630nm)OD值,绘制标准曲线计算浓度。
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