1. 基本介绍
目标分子:血小板衍生生长因子BB(Platelet-Derived Growth Factor-BB, PDGF-BB)是由两条B链组成的同源二聚体,分子量约28-35kDa,是PDGF家族中生物活性最强的亚型。
生物学特性:
主要来源:血小板α颗粒、巨噬细胞、内皮细胞、肿瘤细胞
受体结合:特异性结合PDGFR-α和PDGFR-β
核心功能:
促进间充质细胞增殖和迁移
刺激血管平滑肌细胞增生
参与伤口愈合和组织修复
调控肿瘤微环境形成
临床意义:
动脉粥样硬化斑块形成标志物
肿瘤生长和转移监测(胶质瘤、肉瘤等)
纤维化疾病评估(肺纤维化、肝纤维化)
创伤修复过程监测
检测原理
双抗体夹心ELISA法:
捕获抗体:微孔板包被抗PDGF-BB单克隆抗体
样本孵育:PDGF-BB与固相抗体特异性结合
检测抗体:加入生物素标记的抗PDGF-BB抗体
信号放大:链霉亲和素-HRP复合物结合
显色系统:TMB显色,450nm测定OD值
试剂盒组成
组分 规格 保存条件
预包被微孔板 96T(可拆) 2-8℃(带干燥剂)
PDGF-BB标准品 15.6-1000 pg/mL(冻干粉) -20℃
生物素标记抗体 1.0mL -20℃(避光)
链霉亲和素-HRP 1.0mL -20℃(避光)
样本稀释液 30mL 2-8℃
TMB底物 12mL 2-8℃(避光)
终止液 12mL 室温
20×洗涤缓冲液 50mL 室温
样本要求
适用样本:
血清(推荐无添加剂采血管)
血浆(EDTA或枸橼酸钠抗凝)
细胞培养上清
组织匀浆液(含蛋白酶抑制剂)
样本处理规范:
采血后30分钟内离心(1000×g,15分钟,4℃)
避免使用溶血样本(血红蛋白<0.5g/dL)
分装储存于-80℃(冻融≤3次)
检测前室温缓慢复融,轻柔混匀
检测流程
标准操作程序:
标准品重建:用稀释液配制15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL系列浓度
加样孵育:100μL/孔,37℃湿盒孵育2小时
洗板:自动洗板机300μL/孔洗5次
加检测抗体:100μL/孔,37℃孵育1小时
加酶试剂:100μL/孔,37℃孵育30分钟
显色反应:TMB避光显色20±2分钟
终止读数:50μL终止液,5分钟内450nm读数
公司正在出售的产品:
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上海西格生物科技有限公司
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