商品属性
产品名称 | 人Fetuin-Aelisa试剂盒 | 英文名称 | Human Fetuin-A ELISA Kit |
检测范围 |
| 货号 | PH33502 |
检测原理:采用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA),通过特异性抗体结合待测样本中的Fetuin-A,经酶标显色反应测定其浓度,吸光度(OD值)与样本中Fetuin-A含量呈正相关。
试剂盒组成
预包被微孔板:96孔(或48孔),包被抗人Fetuin-A单克隆抗体。
标准品:浓度梯度为0–2000 ng/mL(冻干粉或液体),需按说明书稀释。
检测抗体:生物素标记的抗人Fetuin-A抗体(1×)。
酶结合物:链霉亲和素-HRP(1×)。
显色底物:TMB溶液(A/B液)。
终止液:2M硫酸溶液。
洗涤缓冲液:20×浓缩液,需稀释后使用。
样本稀释液:适用于血清/血浆样本的缓冲液。

样本要求
样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)。
采集处理:离心去除颗粒物,避免反复冻融(-80℃保存≤3个月)。
稀释比例:通常建议1:100,具体需预实验优化。
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释至工作浓度。
加样:每孔加入标准品或样本100 μL,37℃孵育1小时。
洗涤:弃液后加洗涤液洗板5次。
加检测抗体:每孔加入生物素化抗体100 μL,37℃孵育30分钟。
加酶结合物:每孔加入HRP标记物100 μL,避光孵育20分钟。
显色:加入TMB底物,室温避光反应15分钟。
终止与检测:加入终止液,450 nm波长读取OD值。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线。
通过曲线方程计算样本浓度,乘以稀释倍数即为实际值。
注意事项
保存条件:未开封试剂盒2–8℃保存;开封后酶标板需密封防潮。
质量控制:建议每板设置复孔及阴/阳性对照。
干扰因素:溶血、脂血样本可能影响结果准确性。
适用范围:科研用途,适用于血清Fetuin-A水平检测(如代谢疾病、肿瘤研究等)。
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