商品属性
产品名称 | 人PECAM-1elisa试剂盒 | 英文名称 | Human PECAM-1 ELISA Kit |
检测范围 |
| 货号 | PH33539 |
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法。通过抗人PECAM-1单克隆抗体预包被酶标板，样本中的PECAM-1与固相抗体结合后，加入生物素化抗人PECAM-1抗体形成复合物，再通过辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素与生物素结合，经TMB底物显色。终止反应后，在450nm波长下测定吸光度（OD值），PECAM-1浓度与OD值呈正相关，可通过标准曲线定量。
试剂盒组成（2-8℃保存）
预包被酶标板：96孔
酶标抗体工作液：12mL
10×标本稀释液：12mL
20×浓缩洗涤液：50mL（使用前需蒸馏水稀释）
PECAM-1标准品：50ng/瓶（2瓶）
TMB底物工作液：12mL
生物素化抗体工作液：12mL
终止液（硫酸溶液）：12mL
操作步骤
样本准备：血清、血浆或细胞培养上清液需离心去除颗粒物，避免反复冻融。
加样：
标准品孔：依次加入梯度稀释的标准品（建议浓度：50、25、12.5、6.25、3.125、1.562、0.781、0 ng/mL）100μL。
待测样本孔：加入100μL样本（建议复孔检测）。
空白对照孔：仅加样本稀释液。
孵育：37℃反应120分钟，洗涤4-6次（每次浸泡30秒，拍干）。
加生物素化抗体：每孔100μL，37℃孵育60分钟，洗涤。
加酶标抗体：每孔100μL，37℃避光反应30分钟，洗涤。
显色：每孔加入TMB底物100μL，37℃避光反应15分钟。
终止与检测：每孔加入终止液100μL，30分钟内测定450nm OD值。
结果计算
扣除空白孔OD值后，以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线（建议四参数拟合）。
根据样本OD值从曲线中计算PECAM-1浓度，若样本稀释需乘以稀释倍数。
性能参数
灵敏度：最低检测限<0.1ng/mL。
特异性：仅检测人PECAM-1，与其它细胞因子无交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数（CV）均<10%。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。
洗涤需彻底，防止残留物干扰结果。
开封后未使用的板条需密封防潮保存。
仅限科研用途，不可用于临床诊断。
保存条件
未开封试剂盒4℃保存，开封后按组分要求存放（酶标板需干燥剂密封）。
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