预期应用
用于定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清液或其他相关生物液体中的热休克蛋白70(HSP-70)含量。
适用范围: 仅供体外研究使用,不可用于临床诊断。
产品名称
大鼠HSP70elisa试剂盒
英文名称
RatHSP70 ELISA Kit
分类
Rat/大鼠Elisa试剂盒
检测范围
灵敏度
货号
PR33631
实验原理
采用 双抗体夹心法:
用纯化的抗大鼠HSP-70抗体包被微孔板;
依次加入待测样本或标准品、生物素化的抗HSP-70抗体、HRP标记的亲和素(或酶标抗体);
彻底洗涤后加入底物TMB显色:TMB在过氧化物酶催化下先转为蓝色,酸性终止后变为黄色;
颜色深浅与样本中HSP-70浓度成正比,在450nm波长测定吸光度(OD值)计算浓度。
试剂盒组成
酶联板:96孔预包被板(1块);
标准品(冻干品):2瓶,临用前用样品稀释液稀释至1mL(浓度4,000 pg/ml)。需稀释系列浓度梯度(如4,000、2,000…62.5 pg/ml);
检测抗体:生物素化抗HSP-70抗体;
酶结合物:HRP标记亲和素或抗体;
显色液(TMB)、终止液(酸溶液);
洗涤缓冲液、样品稀释液;
有效期:6个月(生产日期起计)。
操作注意事项
样本处理:血清/血浆需避免反复冻融,浑浊样本需离心;
标准品配制:溶解后需静置10分钟并充分混匀,梯度稀释不可在酶联板内直接进行;
洗涤步骤:每次加液后需彻底洗涤,避免交叉污染;
显色时间控制:显色反应需避光,终止后30分钟内完成读数。
结果计算
以标准品浓度为横坐标、对应OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度(单位:pg/ml)。
注意事项
试剂盒不同批次不可混用;
终止液含腐蚀性液体,避免接触皮肤;
过期或变质试剂(如显色液变蓝)禁止使用。
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