检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。预包被抗小鼠AGP抗体与样本中的AGP结合,加入生物素标记的检测抗体后形成复合物,再与HRP标记的链霉亲和素结合,通过TMB显色。吸光度(OD值)与AGP浓度成正比。
产品名称 | 小鼠AGPelisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse AGP ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 |
|
灵敏度 |
| 货号 | PM33653 |

试剂盒组成

| 组分 | 96T规格 | 48T规格 |
| 预包被微孔板 | 1×96孔 | 1×48孔 |
| AGP标准品 | 2×冻干品 | 1×冻干品 |
| 样本稀释液 | 20mL | 10mL |
| 生物素标记检测抗体 | 1.5mL | 0.75mL |
| HRP标记链霉亲和素 | 1.5mL | 0.75mL |
| TMB显色液 | 10mL | 5mL |
| 终止液(2M H₂SO₄) | 10mL | 5mL |
| 洗涤液(20×浓缩) | 25mL | 15mL |
样本要求

血清/血浆:离心去除颗粒,避免溶血。
细胞上清液:离心后取上清,-20℃短期保存,-80℃长期保存。
组织匀浆:PBS或RIPA裂解后离心取上清。
操作步骤

标准品稀释:用标准品稀释液复溶冻干品,梯度稀释至0.5-50 ng/mL。
加样:每孔加标准品/样本100μL,37℃孵育2小时。
洗涤:弃液体,用1×洗涤液洗3次。
加检测抗体:每孔加100μL生物素标记抗体,37℃孵育1小时。
加酶结合物:每孔加100μL HRP-链霉亲和素,37℃孵育30分钟。
显色:加TMB 90μL,避光显色15分钟。
终止:加终止液50μL,450nm测OD值。
结果计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线。
通过曲线方程计算样本浓度(推荐使用四参数拟合)。
灵敏度与精密度
检测范围:0.1-60 ng/mL
最低检测限:0.05 ng/mL
批内变异:<8%
批间变异:<10%
注意事项

避免反复冻融标准品或样本。
不同批次试剂不可混用。
TMB显色时间需严格控制,避免过度反应。
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关键字: 小鼠;AGP;elisa试剂盒;