产品名称 | 小鼠a-2-Macroglobulinelisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse a-2-Macroglobulin ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 |
|
灵敏度 |
| 货号 | PM33660 |
规格：96孔板/48孔板
产品简介
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的α-2-巨球蛋白（A2M）。具有高灵敏度、高特异性和良好的批间重复性。
检测原理
包被：微孔板预包被抗小鼠A2M单克隆抗体。
结合：样本中的A2M与包被抗体结合。
检测：加入生物素标记的二抗与A2M结合，形成免疫复合物。
显色：加入HRP标记的链霉亲和素，TMB底物显色。
终止：硫酸终止反应，450nm波长测定OD值。
试剂盒组成
| 组分 | 96T规格 | 保存条件 |
| 预包被微孔板 | 1块 | 2-8℃ |
| A2M标准品（10μg/mL）| 2支 | -20℃ |
| 生物素标记检测抗体 | 1瓶 | -20℃ |
| HRP-链霉亲和素 | 1瓶 | 2-8℃ |
| TMB显色液 | 1瓶 | 2-8℃（避光） |
| 终止液 | 1瓶 | 室温 |
| 洗涤缓冲液（20X） | 1瓶 | 室温 |
样本要求
血清/血浆：采集后离心去除颗粒，-20℃保存，避免反复冻融。
细胞上清：离心去除沉淀，立即检测或-80℃保存。
稀释建议：一般样本需稀释10-100倍（具体需预实验确定）。
操作步骤
标准品稀释：用标准品稀释液配制0-1000 ng/mL梯度浓度。
加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育2小时。
洗涤：弃液后拍干，洗涤缓冲液洗3次。
加检测抗体：每孔加入100μL生物素化抗体，37℃孵育1小时。
加酶结合物：洗涤后加入HRP-链霉亲和素，避光孵育30分钟。
显色：加入TMB显色液，室温避光反应15分钟。
终止与检测：加终止液，450nm读取OD值（参考波长630nm）。
数据分析
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线（推荐四参数拟合）。
根据样本OD值从曲线计算浓度，乘以稀释倍数。
性能参数
检测范围：3.12-1000 ng/mL
灵敏度：≤1.0 ng/mL
回收率：85%-115%
批内/批间变异系数：<10%
注意事项
试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融。
TMB显色时间需严格控制，避免过度反应。
样本中避免使用NaN3（影响HRP活性）。
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关键字： 小鼠;a-2-Macroglobulin;elisa试剂盒;