商品属性
产品名称 | 兔sTNFR1/TNFRS1Aelisa试剂盒 | 英文名称 | Rabbit sTNFR1/TNFRS1A ELISA Kit |
检测范围 |
| 货号 | PR33809 |
用途:本试剂盒用于体外定量检测兔血清、血浆、细胞上清液及组织样本中可溶性肿瘤坏死因子受体1(sTNFR1/TNFRS1A)的含量,适用于科研用途。
实验原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将抗sTNFR1抗体预包被于微孔板,加入待测样本和标准品后,与HRP标记的检测抗体形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经洗涤后,加入TMB底物显色,在过氧化物酶催化下产生蓝色产物,酸化后转为黄色。颜色深度与样本中sTNFR1浓度呈正相关,通过450nm波长测定OD值,依据标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
| 组分 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存条件 |
| 预包被微孔板 | 1块 | 1块 | 2-8℃ |
| 标准品(冻干粉) | 2支 | 2支 | -20℃ |
| HRP标记检测抗体 | 1瓶 | 1瓶 | 2-8℃ |
| TMB显色液 | 1瓶 | 1瓶 | 避光2-8℃ |
| 终止液 | 1瓶 | 1瓶 | 2-8℃ |
| 洗涤缓冲液(20X) | 1瓶 | 1瓶 | 室温 |
样本处理要求
血清/血浆:全血室温静置2小时或4℃过夜后,1000×g离心20分钟,取上清检测。避免反复冻融,长期保存需-20℃或-80℃。
细胞上清液:离心去除颗粒物后直接检测或分装冻存。
组织匀浆:按重量体积比1:9加入PBS匀浆,离心取上清。
操作步骤
标准品稀释:用标准品稀释液复溶冻干粉,梯度稀释至所需浓度。
加样:每孔依次加入标准品或样本100μL,37℃孵育60分钟。
洗涤:弃液后每孔加洗涤液300μL,重复5次。
加检测抗体:每孔加HRP标记抗体50μL,37℃孵育30分钟。
显色:加入TMB底物100μL,避光反应15分钟。
终止与检测:加终止液50μL,30分钟内测定450nm OD值。
注意事项
安全性:避免接触终止液和显色液,操作时需佩戴防护用具。
稳定性:未开封试剂盒有效期6个月,开封后组分需按标签条件保存。
重复性:建议复孔检测,CV值应≤15%。
技术参数
检测范围:15.6-1000 pg/mL
灵敏度:<5 pg/mL
特异性:不与兔其他TNF受体家族交叉反应。
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