兔TGF-β2elisa试剂盒 新品

商品属性

目的与适用范围

本试剂盒用于定量测定兔血清、血浆及相关液体样本中的转化生长因子β2 (TGF-β2) 含量。适用于科研研究目的，不可用于临床诊断或治疗。

实验原理

双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：

固相包被：用纯化的兔TGF-β2抗体包被微孔板表面，形成固相抗体。

样本加入：样本中的TGF-β2抗原依次加入微孔中，与固相抗体结合。

酶标抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的TGF-β2抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

洗涤步骤：彻底洗涤未结合物质。

显色反应：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺），在HRP催化下产生蓝色，加酸终止后转化为黄色。颜色的深浅与样本中TGF-β2浓度呈正相关。

检测：使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值）。

试剂盒组成

标准组成 (基于参考内容合成一般性清单，实际组分可能因品牌而异)：

预包被微孔板（96孔）

TGF-β2标准品系列（浓度梯度：0、25、50、100、200、500 pg/mL）

HRP标记抗体工作液

TMB底物溶液

终止液（稀硫酸溶液）

洗涤缓冲液（浓缩，需稀释使用）

封板膜

说明：具体组成可参考试剂盒实际包装。摘要1提到试剂盒包含全部必要试剂，但未详列；请操作前确认厂家提供的完整清单。

样本采集与处理

样本类型：新鲜兔血清或血浆。

采集要求：

采集后立即离心分离血清/血浆。

避免溶血和细菌污染（细菌可能产生假阳性）。

保存方法：

短期保存：置于2-8°C冰箱，最多24小时。

长期保存：如需多次检测，样本应分装小体积，冷冻于-20°C以下。

关键提示：样本解冻后需充分混匀（轻缓上下颠倒，避免强烈震荡）。浑浊样本须先离心或过滤澄清后检测。

检测步骤

操作流程（共需约3-4小时）：

准备工作：将试剂盒各组分恢复至室温（约20-25°C），并按照说明书稀释洗涤缓冲液。

加样：

微孔中依次加入标准品、样本和空白对照（各50 μL），均建议做双份检测以减少误差。

覆盖封板膜，37°C孵育30-60分钟。

洗板：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗板5次，每次静置30秒后拍干。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体工作液50 μL，37°C孵育30分钟。洗板同上。

显色：每孔加入TMB底物溶液50 μL，37°C避光孵育15-20分钟。若显色过浅，可适当延长孵育时间。

终止反应：每孔加入终止液50 μL，终止后溶液由蓝色转为黄色。

读数：30分钟内用酶标仪测定450 nm波长下的OD值。

结果计算

以标准品OD值绘制标准曲线（浓度 vs. OD值），使用软件（如Excel或专业ELISA分析工具）拟合回归方程。

代入样本OD值计算TGF-β2浓度：

公式示例：浓度 (pg/mL) = (样本OD - 空白OD) / 斜率 × 截距。

注意：结果超出标准曲线范围时，样本需稀释后重测。

关键注意事项

实验操作：

严格按说明书步骤进行，结果以酶标仪读数为准。

酶标板开封后未用完的孔应立即用密封袋加干燥剂保存。

所有检测均做双份（包括标准品、样本和空白对照），取平均值以减小误差。

样本处理：

避免反复冻融样本（否则蛋白效价可能降低）。

检测新鲜样本最佳；冻存样本解冻后应充分混匀。

潜在干扰：

血细胞、纤维蛋白或细菌污染可能导致假阳性或本底加深。

安全规范：

终止液为酸溶液，操作时佩戴手套和护目镜。

试剂含生物成分，禁止接触皮肤或口服。

储存与有效期

储存条件：试剂盒置于2-8°C避光保存（避免冻结）；微孔板须放回干燥剂密封。

有效期：参考内容未提及具体时长；典型ELISA试剂盒有效期为6-12个月（保存不当可能导致活性降低）。

公司出售的产品